中脳黒質におけるCRH結合蛋白質の機能解析

本研究では、中脳黒質緻密部においてコルチコトロピン放出ホルモン(CRH)結合蛋白質(CRH-BP)およびCRH受容体(CRHR)、脳由来神経栄養因子(BDNF)は高発現を示すが、これらの遺伝子は特定の運動障害疾患において顕著に発現が低下する。CRH-BPが黒質ドパミンニューロンやその投射先においてCRHの機能発現を制御している可能性や、神経細胞死・生存維持に関与している可能性が想定される。1)黒質ドパミンニューロンおよびその投射先である線条体等におけるCRH-BPによる CRHシグナル制御の分子機構、 2)その機能的意義をラット脳において生化学・分子遺伝学的解析およびインフォマティクス解析により調べることを目標とする。分担研究者らとラット脳を用いたパイロット実験を行い、初代培養の条件の検討を実施。しかしながら神経細胞の生細胞数が十分でなく実験に供することができなかった。引き続き、初代培養を行うほか、市販の細胞を用いた培養系についても検討する。in silico 解析での先行研究において、CRH結合蛋白質(CRH-BP)とCRHの結合体がCRH受容体（CRH-R）に結合できる可能性が示されている。これを踏まえ、CRH-BP－CRH結合体とCRH-Rの結合が、CRH単独でのCRH受容体との結合より安定かどうかについて、複数の協力研究者とin silico解析での予備的検討を行った（暫定の予測結果については非公開）。これらの状況を踏まえ23年度以降の計画を実施する。

本研究では、中脳黒質緻密部においてコルチコトロピン放出ホルモン(CRH)結合蛋白質(CRH-BP)およびCRH受容体(CRHR)、脳由来神経栄養因子(BDNF)は高発現を示すが、これらの遺伝子は特定の運動障害疾患において顕著に発現が低下する。CRH-BPが黒質ドパミンニューロンやその投射先においてCRHの機能発現を制御している可能性や、神経細胞死・生存維持に関与している可能性が想定される。1)黒質ドパミンニューロンおよびその投射先である線条体等におけるCRH-BPによる CRHシグナル制御の分子機構、 2)その機能的意義をラット脳において生化学・分子遺伝学的解析およびインフォマティクス解析により調べることを目標とする。分担研究者らとラット脳を用いたパイロット実験を行い、初代培養の条件の検討を実施。しかしながら神経細胞の生細胞数が十分でなく実験に供することができなかった。引き続き、初代培養を行うほか、市販の細胞を用いた培養系についても検討する。in silico 解析での先行研究において、CRH結合蛋白質(CRH-BP)とCRHの結合体がCRH受容体（CRH-R）に結合できる可能性が示されている。これを踏まえ、CRH-BP－CRH結合体とCRH-Rの結合が、CRH単独でのCRH受容体との結合より安定かどうかについて、複数の協力研究者とin silico解析での予備的検討を行った（暫定の予測結果については非公開）。これらの状況を踏まえ23年度以降の計画を実施する。