遺伝性感覚自律神経性ニューロパチーの原因及び細胞学発症機序の解明

遗传性感觉自主神经病的病因和细胞学机制的阐明

• 批准号: 22K07495
• 负责人: 袁 軍輝
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07495/
• 关键词: 遺伝性感覚自律神経性ニューロパチー; NGS/WES; RFC1; DNTM1; 細胞モデル; 遺伝性ニューロパチー; 次世代シークエンシング; 遺伝子組換え; 機能解析

1）遺伝性感覚自律神経性ニューロパチー（HSAN）の遺伝子診断について、近年RFC1およびNOTCH2NLC内のリピート拡張を解析した報告があり、注目されている。2021年12月までに、日本人HSAN患者の79例の遺伝子解析を実施し、RFC1遺伝子のリピート拡張異常を20例検出することができた。一方、NOTCH2NLCのGGCリピート拡張は1例同定することができた。日本におけるHSANの遺伝的スペクトルと臨床特徴をまとめて、学術論文として発表した(Yuan et al, Frontiers in Neurology, 2022)。2）HSAN type 1Eの原因であるDNMT1の遺伝子変異細胞モデルを作成し、その機能解析を行った。pcDNA3.1プラスミドを使用して変異を導入し、HEK293TとSH-SY5Y細胞にトランスフェクトした。HEK293T細胞からタンパク質の発現を確認し、精製を行い、Western blotやDNMT1タンパク質活性アッセイを行った。変異体のタンパク質の発現量と活性に異常が見出した。また、細胞免疫蛍光染色により、DNMT1変異体の異常な分布も証明された。現在、この研究に関する論文を執筆中である。3）SCN9A遺伝子変異関連神経痛疾患について、臨床的に肢端紅痛症と診断された患者6人のうち、2例がSCN9A変異を有することを明らかにした。さらに、他の2例はParoxysmal extreme pain disorder (PEPD)の患者であり、合わせて4人の患者を集めた。このうち一つの変異は新規であったため、イェール大学Stephen Waxman教授との共同研究でSodium Channelの機能解析を実施した。現在、4例の患者について論文を作成中であり、次年度に学術論文として報告予定である。

1) HSAN gene diagnosis, RFC1 and NOTCH2NLC gene analysis report in recent years In December 2021, 79 cases of HSAN patients in Japan were analyzed and 20 cases of RFC1 gene abnormalities were detected. One side, NOTCH2NLC GGC, one side, NOTCH2NLC, NOTCH 2NLC The clinical features of HSAN in Japan are discussed in academic papers (Yuan et al, Frontiers in Neurology, 2022). 2) HSAN type 1E is the cause of DNMT1's genetic variation. pcDNA3.1 was introduced into HEK293T and SH-SY5Y cells. HEK293T cells were purified by Western blot and DNMT1 protein activity was determined. The abnormal appearance of the abnormal substance and the abnormal activity are observed. The abnormal distribution of DNMT1 was proved by cytoimmunostaining. Now, this research is related to the writing of papers. 3) SCN9A gene expression was associated with neuropathic pain in 6 patients and SCN9A gene expression was associated with acrodynia in 2 patients. 2 cases of Paroxysmal extreme pain disorder (PEPD) were reported. The new regulation is implemented by Professor Stephen Waxman of the University of California, who has jointly studied the function analysis of Sodium Channel. Now, 4 cases of patients are in the process of writing papers, and the next year's academic papers are scheduled to be published.

项目成果

Clinical phenotypic diversity of NOTCH2NLC-related disease in the largest case series of inherited peripheral neuropathy in Japan

• DOI: 10.1136/jnnp-2022-330769
• 发表时间: 2023-03
• 期刊: Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry
• 作者: M. Ando;Y. Higuchi;Junhui Yuan;A. Yoshimura;M. Dozono;Takahiro Hobara;Fumika Kojima;Yutaka Noguchi;Mika Takeuchi;Jun Takei;Y. Hiramatsu;S. Nozuma;Tomonori Nakamura;Y. Sakiyama;A. Hashiguchi;E. Matsuura;Y. Okamoto;J. Sone;H. Takashima

Redefine Genetic Spectrum of Hereditary Sensory and Autonomic Neuropathy

重新定义遗传性感觉和自主神经病的遗传谱

• 发表时间: 2022
• 作者: Yuan Jun-Hui;Higuchi Yujiro;Ando Masahiro;Matsuura Eiji;Hashiguchi Akihiro;Yoshimura Akiko;Takashima Hiroshi
• 通讯作者: Takashima Hiroshi

Genetic spectrum and founder effect of non-dystrophic myotonia: a Japanese case series study

• DOI: 10.1007/s00415-022-11305-6
• 发表时间: 2022-07-30
• 期刊: JOURNAL OF NEUROLOGY
• 影响因子: 6
• 作者: Yuan，Jun-Hui;Higuchi，Yujiro;Takashima，Hiroshi
• 通讯作者: Takashima，Hiroshi

An NEFH founder mutation causes broad phenotypic spectrum in multiple Japanese families

• DOI: 10.1038/s10038-022-01019-y
• 发表时间: 2022-01-28
• 期刊: JOURNAL OF HUMAN GENETICS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ando, Masahiro;Higuchi, Yujiro;Takashima, Hiroshi
• 通讯作者: Takashima, Hiroshi