遺伝性感覚自律神経性ニューロパチーの原因及び細胞学発症機序の解明

1）遺伝性感覚自律神経性ニューロパチー（HSAN）の遺伝子診断について、近年RFC1およびNOTCH2NLC内のリピート拡張を解析した報告があり、注目されている。2021年12月までに、日本人HSAN患者の79例の遺伝子解析を実施し、RFC1遺伝子のリピート拡張異常を20例検出することができた。一方、NOTCH2NLCのGGCリピート拡張は1例同定することができた。日本におけるHSANの遺伝的スペクトルと臨床特徴をまとめて、学術論文として発表した(Yuan et al, Frontiers in Neurology, 2022)。2）HSAN type 1Eの原因であるDNMT1の遺伝子変異細胞モデルを作成し、その機能解析を行った。pcDNA3.1プラスミドを使用して変異を導入し、HEK293TとSH-SY5Y細胞にトランスフェクトした。HEK293T細胞からタンパク質の発現を確認し、精製を行い、Western blotやDNMT1タンパク質活性アッセイを行った。変異体のタンパク質の発現量と活性に異常が見出した。また、細胞免疫蛍光染色により、DNMT1変異体の異常な分布も証明された。現在、この研究に関する論文を執筆中である。3）SCN9A遺伝子変異関連神経痛疾患について、臨床的に肢端紅痛症と診断された患者6人のうち、2例がSCN9A変異を有することを明らかにした。さらに、他の2例はParoxysmal extreme pain disorder (PEPD)の患者であり、合わせて4人の患者を集めた。このうち一つの変異は新規であったため、イェール大学Stephen Waxman教授との共同研究でSodium Channelの機能解析を実施した。現在、4例の患者について論文を作成中であり、次年度に学術論文として報告予定である。

1）遺伝性感覚自律神経性ニューロパチー（HSAN）の遺伝子診断について、近年RFC1およびNOTCH2NLC内のリピート拡張を解析した報告があり、注目されている。2021年12月までに、日本人HSAN患者の79例の遺伝子解析を実施し、RFC1遺伝子のリピート拡張異常を20例検出することができた。一方、NOTCH2NLCのGGCリピート拡張は1例同定することができた。日本におけるHSANの遺伝的スペクトルと臨床特徴をまとめて、学術論文として発表した(Yuan et al, Frontiers in Neurology, 2022)。2）HSAN type 1Eの原因であるDNMT1の遺伝子変異細胞モデルを作成し、その機能解析を行った。pcDNA3.1プラスミドを使用して変異を導入し、HEK293TとSH-SY5Y細胞にトランスフェクトした。HEK293T細胞からタンパク質の発現を確認し、精製を行い、Western blotやDNMT1タンパク質活性アッセイを行った。変異体のタンパク質の発現量と活性に異常が見出した。また、細胞免疫蛍光染色により、DNMT1変異体の異常な分布も証明された。現在、この研究に関する論文を執筆中である。3）SCN9A遺伝子変異関連神経痛疾患について、臨床的に肢端紅痛症と診断された患者6人のうち、2例がSCN9A変異を有することを明らかにした。さらに、他の2例はParoxysmal extreme pain disorder (PEPD)の患者であり、合わせて4人の患者を集めた。このうち一つの変異は新規であったため、イェール大学Stephen Waxman教授との共同研究でSodium Channelの機能解析を実施した。現在、4例の患者について論文を作成中であり、次年度に学術論文として報告予定である。