POU1F1 βアイソフォーム異常にもとづく先天性下垂体機能低下症の疾患概念確立

本研究の目的は、1.POU1F1 βドメイン領域のバリアント頻度・表現型の解明、2.POU1F1 βアイソフォームの機能の解明　の2点である1.POU1F1 βドメイン領域のバリアント頻度・表現型の解明: 2022年度は代表研究者の所属する研究室に依頼のあった成長ホルモン分泌不全症疑い患者のうち、原因が同定されていない症例のDNA検体を用いて該当領域のバリアントの有無を確認した。結果は49症例を解析し、バリアント陽性検体は0であった。2.POU1F1 βアイソフォームの機能の解明: 2022年度はすでに作成したPOU1F1αアイソフォームにTurboIDを結合させた融合タンパク質を発現するHeLa細胞に加え、POU1F1βアイソフォームを発現する細胞株、コントロールに使用する核内以降シグナル(NLS)をTurboIDに結合したTurboID-NLSを発現した細胞株を樹立した。いずれの細胞株でも対象タンパク質が核内に局在することを確認した。これらの安定発現株を用いて近接性ラベリングを実施した。現在その結果を解析中である。マウス作製に関しては対象とするバリアントを有する系統を得た。

本研究の目的は、1.POU1F1 βドメイン領域のバリアント頻度・表現型の解明、2.POU1F1 βアイソフォームの機能の解明　の2点である1.POU1F1 βドメイン領域のバリアント頻度・表現型の解明: 2022年度は代表研究者の所属する研究室に依頼のあった成長ホルモン分泌不全症疑い患者のうち、原因が同定されていない症例のDNA検体を用いて該当領域のバリアントの有無を確認した。結果は49症例を解析し、バリアント陽性検体は0であった。2.POU1F1 βアイソフォームの機能の解明: 2022年度はすでに作成したPOU1F1αアイソフォームにTurboIDを結合させた融合タンパク質を発現するHeLa細胞に加え、POU1F1βアイソフォームを発現する細胞株、コントロールに使用する核内以降シグナル(NLS)をTurboIDに結合したTurboID-NLSを発現した細胞株を樹立した。いずれの細胞株でも対象タンパク質が核内に局在することを確認した。これらの安定発現株を用いて近接性ラベリングを実施した。現在その結果を解析中である。マウス作製に関しては対象とするバリアントを有する系統を得た。