Characterization of PLAGL1-FOXO1 fusion gene in alveolar rhabdomyosarcoma

肺泡型横纹肌肉瘤中 PLAGL1-FOXO1 融合基因的特征

• 批准号: 22K07940
• 负责人: 宮地 充
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07940/
• 关键词: 横紋筋肉腫; PLAGL1; FOXO1; 融合遺伝子

令和4年度は、まず、PLAGL1-FOXO1融合遺伝子の全長をPCR増幅し、クローニングした。クローニングされたPLAGL1-FOXO1融合遺伝子の全長の配列が正しい配列であることをSangerシーケンスにて確認した。次にPLAGL1-FOXO1融合遺伝子をGFPベクターにサブクローニングし、293細胞株にトランスフェクションし、細胞内局在を確認した。蛍光顕微鏡で観察したところ、コントロールベクターを導入した細胞では、細胞全体に蛍光を認めたのに対して、PLAGL1-FOXO1融合遺伝子をサブクローニングしたGFPベクターを導入した細胞では蛍光が核内に局在していることが確認された。PLAGL1-FOXO1融合遺伝子は、PLAGL1遺伝子のDNA結合ドメインが保持されていることから、核内の局在が予想され、予想と合致した結果であった。FLAGベクターにもPLAGL1-FOXO1融合遺伝子をサブクローニングし、293細胞株に強制発現させたが、PLAGL1-FOXO1融合遺伝子の塩基長が長いためか、トランスフェクション効率が悪く、ウエスタンブロッティング法によるPLAGL1-FOXO1タンパクの同定には至らなかった。マウス筋芽細胞株であるC2C12細胞株やマウス線維芽細胞株である3T3細胞株のPLAGL1-FOXO1安定発現細胞株を作成するため、PLAGL1-FOXO1融合遺伝子をMSCVベクターにサブクローニングし、PLAGL1-FOXO1融合遺伝子の全長の配列が正しい配列であることをSangerシーケンスにて確認した。令和5年度以降、このベクターを用いて、C2C12細胞株や3T3細胞株のPLAGL1-FOXO1安定発現細胞株を作成し、PLAGL1-FOXO1融合遺伝子の機能解析を行う。

Ling and in 2004, the whole length of PCR and PLAGL1-FOXO1 will be combined with each other. It is important to ensure that the full length of the PLAGL1-FOXO1 is integrated. The column is configured to ensure that the full length of the Sanger is correct. The sub-PLAGL1-FOXO1 fusion gene, GFP cell line, and intracellular cell line, were detected. The whole cell, the whole cell, the cell, the GFP, the GFP, the cell, the cell The combination of PLAGL1-FOXO1, PLAGL1, and DNA was used to keep the disease in check, and the nuclear bureau was thinking about it and thinking about it, so that the results were satisfactory. The FLAG fusion gene, the PLAGL1-FOXO1 fusion gene, the PLAGL1-FOXO1 fusion gene, the cell line 293 cell line, the cell line, the cell line The whole length of the whole cell line of PLAGL1-FOXO1 fusion cell, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of PLAGL1-FOXO1 fusion cell line, the whole length of each cell line, the whole length of each cell line, the cell line, In the last five years, the cell lines of C2C12, 3T3, PLAGL1-FOXO1 and PLAGL1-FOXO1 can be analyzed and analyzed.

项目成果

Identification of the PLAGL1-FOXO1 fusion gene in a case of alveolar rhabdomyosarcoma.

肺泡横纹肌肉瘤病例中 PLAGL1-FOXO1 融合基因的鉴定。

• 发表时间: 2022
• 作者: Sugitatsu Y,Oya S,Kondo H,Tomida A;Yoshida H,Miyachi M,Kikuchi K;Tsuchiya K;Iehara T
• 通讯作者: Iehara T