The study about the mechanism of postmenopausal non-alcoholic steatohepatitis using single-cell RNA sequencing

单细胞RNA测序研究绝经后非酒精性脂肪性肝炎发病机制

• 批准号: 22K07963
• 负责人: 田中 正剛
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07963/
• 关键词: 非アルコール性脂肪肝炎; NASH; 閉経; エストロゲン; クッパー細胞; マクロファージ; 肝星細胞; 一細胞遺伝子発現解析; 閉経後

非アルコール性脂肪肝炎 (non-alcoholic steatohepatitis; NASH) は肝脂肪化を基盤として、炎症・線維化が起きる病態であるが、その発症機序はまだ十分には解明されていない。NASHの有病率には性差が存在し、女性は閉経前には男性より有病率が低いが、閉経後には男性と同程度となることが知られており、閉経による内因性エストロゲンの減少がNASH発症を促進すると考えられている。しかし、エストロゲンのマクロファージや肝星細胞等の非実質細胞に対する作用については不明な点が多い。そこで野生型マウスおよびMC4R欠損雌性マウス7週齢に両側卵巣摘出術（対照群としてシャム手術）を行い、その1週間後より高脂肪・高コレステロール食を20週間負荷し、閉経後NASHマウスを作製した。体重、肝重量、肝酵素、NAFLD activity score、Fibrosis scoreともMC4R欠損雌性マウスに両側卵巣摘出術を施行した群（閉経後NASH群）で有意に増加を認めた。Whole liverを用いたマイクロアレイによる遺伝子発現解析を行い、パスウェイ解析において閉経後NASH群で細胞外マトリクス受容体相互作用、Focal adhesion経路、PI3-Aktシグナル経路、サイトカイン・ケモカインシグナル経路の遺伝子発現が有意に亢進していた。また、コラゲナーゼ灌流法により肝臓から非実質細胞を分離し、フローサイトメトリーにてCD45陽性細胞をF4/80とCD11bで展開し、組織常在性のマクロファージ(F4/80 high, CD11b low)と骨髄由来のマクロファージ(F4/80 low, CD11b high)の分画の割合を検討したところ、閉経後NASH群では、卵巣摘出を行なったマウスにおいて、骨髄由来のマクロファージ分画の増加と組織常在性のマクロファージ分画の低下を認めた。

Non-alcoholic steatohepatitis (NASH) is characterized by fatty liver disease, inflammation, and linear development. The prevalence of NASH is lower in women than in men, and lower in men than in men. There are many unclear points about the role of non-solid cells such as Shika Shi, Esstrogen and Michelofia, and hepatic stellate cells. The wild-type female has a high fat content and a high fat content. The female has a low fat content and a low fat content. The female has a low fat content and a low fat content. The female has a low fat content and a low fat content. The female has a low fat content and a low fat content. Body weight, liver weight, liver enzymes, NAFLD activity score, Fibrosis score and MC4R deficiency in females were intentionally increased after the procedure of lateral egg extraction (NASH). The Whole liver is used in the analysis of gene expression, the analysis of gene expression in the post-closed NASH group, extracellular receptor interaction, Focal adhesion pathway, PI3-Akt pathway, and the intentional enhancement of gene expression in the serological pathway. CD45-positive cells F4/80 and CD11b were isolated by perfusion method.(F4/80 high, CD11b low) and the origin of bone marrow (F4/80 low, CD11b high), the separation of pictures, the separation of pictures, the separation of pictures,

项目成果

肝非実質細胞に注目した閉経後NASHの発症・増悪メカニズムの解析

以肝非实质细胞为中心分析绝经后NASH发病及加重机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 青柳知美;鈴木秀生;高橋基;井本効志;東夕喜;大野あかり;黒川美穂;田代茂樹;合谷孟;田中正剛;国府島庸之;小川佳宏
• 通讯作者: 小川佳宏

NASH関連肝癌モデルマウスを用いた抗PD-1抗体の肝癌に対する効果についての検討

使用NASH相关肝癌模型小鼠检查抗PD-1抗体对肝癌的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: 高橋基;国府島庸之;東夕喜;大野あかり;青柳知美;井本効志;黒川美穂;田代茂樹;合谷孟;田中正剛;小川佳宏
• 通讯作者: 小川佳宏