膵癌進展の病態伝播を担う細胞外小胞の機能解明~臨床応用を目指して~

阐明在胰腺癌病理增殖中发挥作用的细胞外囊泡的功能～以临床应用为目标～

• 批准号: 22K07982
• 负责人: 坪井 順哉
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Mie University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07982/
• 关键词: 細胞外小胞; 膵がん; 膵癌

膵がんのEUS-FNA検体、36検体から細胞外小胞（EV)を回収し、calceinで染色し、flow cytometryにてintact EV数を測定した。採取したEVはその後カラムを用いて精製し、サイズの測定も行った。また、コントロールとして自己免疫性膵炎(AIP)6例の残余検体からEVを回収した。ステージⅠ～Ⅳ、AIPの比較を行ったところ、EV数の平均はステージⅠ：13578 particles/ul、ステージⅡ：11227 particles/ul、ステージⅢ：14708 particles/ul、ステージⅣ：9176 particles/ul、AIP：10246 particles/ulであり、ステージⅠ、Ⅱに比べⅢは高くなるが、ステージⅣでは減少を認めた。EVの平均サイズについてはステージⅠ：275nm、ステージⅡ：288nm、ステージⅢ：307nm、ステージⅣ：277nm、AIP：255nmであり、ステージⅢまでは上昇し、ステージⅣで低下を認めた。今後さらに検体を追加して解析する予定である。当初は、膵がん患者から得られたEVをヒトのがん関連線維芽細胞（CAF)などに添加し、細胞の活性化を細胞形態や遺伝子発現の変化により検討する予定であったが、EUS-FNA残余検体から得られるEV数が極めて少なかったため、ヒト膵がん細胞株を用いてEVを回収する方針とした。ヒト膵がん細胞株はPanc-1、MIA-Paca-2を使用した。膵がん細胞増殖に関わるサイトカインとして既知のIL-1β、IL-6、TNF-αを用いて膵がん細胞株の刺激を行ったところ、いずれのサイトカインにおいてもEVの放出を認めた。このことは、膵癌の病態進展に寄与するサイトカインによりEVが放出されることを示唆している。現在、EVを放出するサイトカインの至適濃度を調整中である。

赵がんのEUS-FNA body, 36 body body, recovery of extracellular vesicles (EV), calcein staining, flow cytometry, determination of the number of intact EVs. After collecting the したEV はそのカラムを and using the いて refined し, サイズの measure the も行った.また、コントロールとして Residual body からEVを recovery of 6 cases of autoimmune inflammation (AIP).ステージⅠ~Ⅳ, AIPの行ったところ, EV number average はステージⅠ: 13578 particles/ul, ステージⅡ: 11227 particles/ul、ステージⅢ：14708 particles/ul、ステージⅣ：9176 particles/ul、AIP：10246 particles/ulであり, ステージⅠ, Ⅱに are higher than べⅢは, くなるが, ステージⅣでは are reduced, and を recognize めた. EV average サイズについてはステージⅠ: 275nm, ステージⅡ: 288nm, ステージⅢ: 307nm,ステージⅣ: 277nm, AIP: 255nmであり, ステージⅢまではRISING し, ステージⅣでlow をcognizeめた. From now on, we will add new analysis and pre-decided content to our website. At that time, the patient who was diagnosed with the disease was diagnosed with EV-associated fibroblasts (CA). F) などにAddition, cell activation, cell morphology, and transformation of cell morphology It is a predetermined decision, and the EUS-FNA residual body is determined and the EV number is extremely high. This is a policy for the recycling of Toto's cell lines and Toto's cell lines. The ヒト膵がん cell lines, Panc-1 and MIA-Paca-2, were used.赵がん Cell Propagation System The stimulation of て膵がん cell line and the release of いずれのサイトカインにおいてもEVの are released.このことは, 膵 Cancer の morbid progress に Send and す る サ イ ト カ イ ン に よ り EV が 出 さ れ る こ と を 出款 し い る. Now, the EV するサイトカインの is adjusted to the appropriate concentration.