ヒト胃オルガノイド培養に基づく幹細胞老化に伴う発癌ポテンシャル獲得機序の解明

加齢は発がん要因の１つである。老化が関わるヒト分化型粘膜内胃癌における発がん機序を、ヒト胃オルガノドを用いて明らかにすることを目的として研究を開始した。粘膜内癌に対して内視鏡治療を受ける患者より同意（倫理委員会承認済）を得た後、癌部および非癌部より生検組織を採取し胃オルガノド樹立を試みた。14症例から確実に胃癌および非癌部より対で樹立できたのは6例であった。まず６例中１例を用いて遺伝子発現プロファイルを明らかにするために、Human Clariom S Microarray Assayを行い、さらにGene Set Enrichment Analysis(GSEA)をした。その結果、Wnt/beta-catenin 細胞内シグナルが活性化し、細胞増殖能は亢進、細胞老化は抑制されていた。次に96 well TaqMan Gene Expression Arrayを用いて対で樹立できたオルガノドを対象に遺伝子発現プロファイルを行った。その結果、全例で発現パターンが同一のWnt/beta-catenin 細胞内シグナル活性化を裏付ける遺伝子を5個同定できた。さらに胃癌オルガノドでは、MTS法で細胞増殖能が亢進し、p16低下あるいはpRB脱リン酸化抑制を認め、SA-beta-gal法で老化細胞数が低下していることが確認できた。このため、先行研究で得た、加齢マウス（野生型）由来胃オルガノドの遺伝子発現プロファイルと、本研究がある面において類似していることも明らかになった。

加齢は発がん要因の１つである。老化が関わるヒト分化型粘膜内胃癌における発がん機序を、ヒト胃オルガノドを用いて明らかにすることを目的として研究を開始した。粘膜内癌に対して内視鏡治療を受ける患者より同意（倫理委員会承認済）を得た後、癌部および非癌部より生検組織を採取し胃オルガノド樹立を試みた。14症例から確実に胃癌および非癌部より対で樹立できたのは6例であった。まず６例中１例を用いて遺伝子発現プロファイルを明らかにするために、Human Clariom S Microarray Assayを行い、さらにGene Set Enrichment Analysis(GSEA)をした。その結果、Wnt/beta-catenin 細胞内シグナルが活性化し、細胞増殖能は亢進、細胞老化は抑制されていた。次に96 well TaqMan Gene Expression Arrayを用いて対で樹立できたオルガノドを対象に遺伝子発現プロファイルを行った。その結果、全例で発現パターンが同一のWnt/beta-catenin 細胞内シグナル活性化を裏付ける遺伝子を5個同定できた。さらに胃癌オルガノドでは、MTS法で細胞増殖能が亢進し、p16低下あるいはpRB脱リン酸化抑制を認め、SA-beta-gal法で老化細胞数が低下していることが確認できた。このため、先行研究で得た、加齢マウス（野生型）由来胃オルガノドの遺伝子発現プロファイルと、本研究がある面において類似していることも明らかになった。