Development of prophylaxis and therapeutics for autoimmune gastritis targeting gastric mucosa-associated microbiota and follicular regulatory T cell

自己免疫性胃炎 (AIG) のマウスモデルは生後3日目のBALB/c nu/+マウスを冷凍仮死後、鎖骨付近の皮膚を切開し、胸鎖乳突筋と鎖骨の間からピペットを挿入し、胸腺両葉を吸引摘出して作成し、コントロールマウスには皮膚切開とピペット挿入のみによるsham手術を実施した。胸腺摘出3ヵ月後、6ヵ月後の解剖は終了しており、これから12ヵ月後の解剖を行うところである、胸腺摘出3ヵ月後、6ヵ月後にはすでに肉眼的および病理組織学的にAIGによる胃炎が発症していることを視認し、またAIGが形成された胃内のpHはほぼ全例において4以上となっていることを確認した。マウス血清中における抗胃壁細胞抗体については研究用ELISAキットを用いて測定を行ったが、AIG発症マウスにおいて必ずしも有意な上昇はみられなかった。ヒトについても、これまでA型胃炎患者20名とヘリコバクター・ピロリ未感染コントロール12名から内視鏡下に粘膜層ブラシおよび粘膜生検によって検体を採取した。これらマウス、ヒトの検体からのDNA、mRNAの抽出は完了し、現在MiSeq次世代シークエンシングシステムを用いた胃粘膜関連細菌叢の解析およびトランスクリプトーム解析による遺伝子発現プロファイリングを行っているところである。今回AIGマウスモデルの作成の手技については研究期間内に確立できたと考える。ヒトのA型胃炎においては抗胃壁細胞抗体価の上昇が高率にみられるのに対して、マウスではそれは必ずしも重要ではないように推察しているが、研究用試薬の精度については現在他の試薬を用いて検証中である。

自己免疫性胃炎 (AIG) のマウスモデルは生後3日目のBALB/c nu/+マウスを冷凍仮死後、鎖骨付近の皮膚を切開し、胸鎖乳突筋と鎖骨の間からピペットを挿入し、胸腺両葉を吸引摘出して作成し、コントロールマウスには皮膚切開とピペット挿入のみによるsham手術を実施した。胸腺摘出3ヵ月後、6ヵ月後の解剖は終了しており、これから12ヵ月後の解剖を行うところである、胸腺摘出3ヵ月後、6ヵ月後にはすでに肉眼的および病理組織学的にAIGによる胃炎が発症していることを視認し、またAIGが形成された胃内のpHはほぼ全例において4以上となっていることを確認した。マウス血清中における抗胃壁細胞抗体については研究用ELISAキットを用いて測定を行ったが、AIG発症マウスにおいて必ずしも有意な上昇はみられなかった。ヒトについても、これまでA型胃炎患者20名とヘリコバクター・ピロリ未感染コントロール12名から内視鏡下に粘膜層ブラシおよび粘膜生検によって検体を採取した。これらマウス、ヒトの検体からのDNA、mRNAの抽出は完了し、現在MiSeq次世代シークエンシングシステムを用いた胃粘膜関連細菌叢の解析およびトランスクリプトーム解析による遺伝子発現プロファイリングを行っているところである。今回AIGマウスモデルの作成の手技については研究期間内に確立できたと考える。ヒトのA型胃炎においては抗胃壁細胞抗体価の上昇が高率にみられるのに対して、マウスではそれは必ずしも重要ではないように推察しているが、研究用試薬の精度については現在他の試薬を用いて検証中である。