クローン病の腸管内病原性共生菌に特異的なIgAを用いた新しい診断と治療技術の開発

本研究の目的は、クローン病（CD）に関連する病原性共生菌である接着性侵入性大腸菌（Adherent Invasive E. coli ; AIEC)に対するIgA応答の解明とその臨床応用である。申請者はまず、獲得免疫誘導のために抗生剤前処理（ストレプトマイシン、アンピシリン）を行ったSPFマウスにAIECの代表株であるLF82を長期感染させるモデルマウスの作製に成功した。すると、AIEC感染マウスでは3週目以降にAIECに反応するIgAが誘導されることを見出した。この抗AIEC-IgA抗体は非病原性大腸菌（HS株を使用）には反応は示さず、AIECに特異的であることが分かった。これは、複数のnon-AIEC株、AIEC株の細菌を用いて検討したが、明確に両者を識別できることが示された。さらに、AIECに代表的な表面抗原であるFimH, OmpA, OmpCをそれぞれの欠損株を用いて評価することで、抗AIEC-IgA抗体が認識している病原抗原である可能性が示唆された。さらに、この抗AIEC-IgA抗体が産生される生理的な意義を示すため、AIECに対するin vitroでの抗体下でのinvasion assayを行った。その結果、興味深いことに、抗AIEC-IgA抗体は、非病原性大腸菌感染マウス由来のIgA分画、および大腸菌感染のないコントロールマウス由来のIgA分画と比較して、明確にAIECの上皮細胞セルライン(Caco-2)への侵入を阻害することが示された。これは、免疫組織化学染色でも同様の結果を得ることに成功した。

本研究の目的は、クローン病（CD）に関連する病原性共生菌である接着性侵入性大腸菌（Adherent Invasive E. coli ; AIEC)に対するIgA応答の解明とその臨床応用である。申請者はまず、獲得免疫誘導のために抗生剤前処理（ストレプトマイシン、アンピシリン）を行ったSPFマウスにAIECの代表株であるLF82を長期感染させるモデルマウスの作製に成功した。すると、AIEC感染マウスでは3週目以降にAIECに反応するIgAが誘導されることを見出した。この抗AIEC-IgA抗体は非病原性大腸菌（HS株を使用）には反応は示さず、AIECに特異的であることが分かった。これは、複数のnon-AIEC株、AIEC株の細菌を用いて検討したが、明確に両者を識別できることが示された。さらに、AIECに代表的な表面抗原であるFimH, OmpA, OmpCをそれぞれの欠損株を用いて評価することで、抗AIEC-IgA抗体が認識している病原抗原である可能性が示唆された。さらに、この抗AIEC-IgA抗体が産生される生理的な意義を示すため、AIECに対するin vitroでの抗体下でのinvasion assayを行った。その結果、興味深いことに、抗AIEC-IgA抗体は、非病原性大腸菌感染マウス由来のIgA分画、および大腸菌感染のないコントロールマウス由来のIgA分画と比較して、明確にAIECの上皮細胞セルライン(Caco-2)への侵入を阻害することが示された。これは、免疫組織化学染色でも同様の結果を得ることに成功した。