炎症性腸疾患における腸管上皮障害評価システムの構築

炎症性肠病肠上皮损伤评价体系的构建

• 批准号: 22K08048
• 负责人: 小林 真理子
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08048/
• 关键词: 炎症性腸疾患; IBD人工モデル; 上皮障害度

炎症性腸疾患（IBD）は寛解と再燃を繰り返す難治性の炎症性腸疾患である。現在の治療目標は炎症を制御し症状を改善させるのみならず、内視鏡的に潰瘍が存在しない粘膜治癒が提唱されている。これは炎症細胞に加えて腸管上皮細胞の修復までが病勢に密接に関与することを示唆しているが、上皮細胞の障害度を組織学的、機能的に評価するシステムは存在しない。申請者らはヒト大腸オルガノイドによるIBD人工モデルを構築し、IBD上皮脆弱性に関与する因子群を同定した。脆弱性因子を抑制させると炎症環境下においても上皮細胞の増殖促進を認めたことから、上皮細胞の脆弱性はIBDの病勢や予後に密接に関与するのではと着想した。本研究では、IBD患者検体由来の組織、オルガノイドを樹立し多角的な解析により上皮障害度を評価するシステムを構築することを目的とする。本年度はこれまで申請者らが同定してきた分子についての評価法をパイロット試験にて検討した。 また、IBD患者内視鏡検体から小腸・大腸オルガノイドを樹立した。オルガノイドは炎症刺激物質が含まれない培養条件にて1ヶ月以上培養し、検体採取前の体内の炎症環境の影響が排除された状態で解析を行った。解析項目は以下の通りである。・粘膜バリア機能：杯細胞数・Atoh1・MUC2・TFF3の発現を内視鏡生検検体の病理標本からHE染色及び免疫染色にて1腺管中の杯細胞数、各蛋白陽性細胞数を測定。・上皮脆弱性評価：ki-67、SLFN11の発現を評価。・炎症蓄積度評価：DUOXA2発現、テロメア長解析。

Inflammatory Bowel Disease (IBD) Refractory IBD The goal of treatment is to control inflammation, improve symptoms, and improve mucosal healing. The inflammatory cells are involved in the repair of intestinal epithelial cells, which are closely related to the disease. The damage of epithelial cells is histologically and functionally evaluated. The applicant identified a set of factors associated with IBD epithelial vulnerability by identifying the type of tissue that is responsible for IBD infection. Vulnerability factors inhibit proliferation of epithelial cells in inflammatory environments. Vulnerability of epithelial cells is closely related to IBD. This study aims to establish a multi-angle analysis of tissue origin, tissue structure, and tissue damage assessment in patients with IBD. This year, the applicant has been selected and evaluated. Endoscopic examination of patients with IBD: small intestine, large intestine and small intestine. To analyze the effects of inflammatory stimulation substances on the culture conditions for more than 1 month and the inflammatory environment in vivo before sample collection Analysis of the following items.·Mucosal membrane function: goblet cell count, Atoh1, MUC2, TFF3 development, endoscopic pathology, HE staining and immunostaining, goblet cell count and protein-positive cell count in duct 1 were determined. Epithelial vulnerability assessment: ki-67, SLFN11 development assessment.·Inflammation accumulation evaluation: DUOXA2 expression, temperature analysis.