N-ミリストイル化を介したオートファジー制御機構の解明と新しい心不全治療法の開発

阐明N-肉豆蔻酰化介导的自噬控制机制并开发新的心力衰竭治疗方法

• 批准号: 22K08161
• 负责人: 冨田 湧介
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fukushima Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08161/
• 关键词: 心不全; N-ミリストイル化; 蛋白翻訳後修飾; オートファジー; GLIPR2

心不全の病態において不良なタンパク質の蓄積が関与しており、心不全の発症進展を防ぐために心筋細胞内の恒常性維持機構が備わっている。オートファジーは、タンパク質の品質管理機構の重要な仕組みであるため、オートファジーの異常は心不全を含めて様々な疾患と関連する。タンパク質のN-ミリストイル化は重要な翻訳後修飾であるが、心筋細胞におけるミリストイル化基質タンパクの網羅的解析により、オートファジーに関連するタンパク質GLIPR2をその候補分子の一つとして同定した。本研究はオートファジーにおけるGLIPR2ミリストイル化の意義を解明し、心臓における役割を明らかにすることを目的とする。当該年度は、N-ミリストイル化GLIPR2のオートファジーにおける役割の検討を行なった。N-ミリストイル化を受けない変異型GLIPR2の意義を評価するため、N末端2番目のグリシンをアラニンに変異させたG2A変異型、N末端3番目のリジンをアルギニンに変異させたK3R変異型、その両方を持つG2A/K3R変異型GLIPR2のコンストラクトを作成した。このコンストラクトをH9c2細胞に導入し、細胞内局在、オートファジー関連分子、生存率を評価した。オートファジー促進/抑制状態やAngiotensin IIなどの病的状態での意義も検討している。

不良蛋白质的积累参​​与心力衰竭的病理，并且在心肌细胞中具有稳态维持机制，以防止心力衰竭发展。由于自噬是蛋白质质量控​​制机制的重要机制，因此自噬异常与多种疾病有关，包括心力衰竭。尽管蛋白质的N-伴酰胺化是一种重要的翻译后修饰，但通过对心肌细胞中肉豆蔻酰化的底物蛋白的全面分析，将自噬相关蛋白GLIPR2鉴定为其候选分子之一。这项研究旨在阐明GLIPR2肉豆蔻酰化在自噬中的重要性，并阐明其在心脏中的作用。在今年中，检查了N- myristoy的GLIPR2在自噬中的作用。为了评估不经历n- my列扬酰化的突变glipr2的重要性，我们为g2a/k3r突变glipr2创建了一种构造，既包含g2a/k3r突变glipr2 g2a突变体G2a突变g2a突变体G2a突变g2a突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2A突变体G2A突变g2a突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变G2A突变G2A突变G2A突变体G2A突变g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2a g2 g2 g2 g2a g2 g2a g2a g2a g2a g2a g2 g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2 g2a突变体G2a突变g2a突变g2a突变g2a突变g2a突变体G2a突变g2a突变体G2a突变g2a突变g2a突变体G2a突变体G2a突变体G2A突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2a突变体G2A突变G2A突变体G2A突变体G2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2a g2 g2a g2 ga2a g2a突变体G2a突变g2a突变体G2a突变g2a突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2A突变体G2A突变g2a突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2a突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变G2A突变G2A突变G2A突变体G2A突变g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2 g2a g2 g2 g2 g2a g2 g2a g2a g2a g2a g2a g2 g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2a g2 g2a突变的G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A突变体G2A Mut该构建体被引入H9C2细胞中，以评估亚细胞定位，自噬相关的分子和存活率。还研究了自噬促进/抑制状态和血管紧张素II等病理状况的重要性。

项目成果

Decreases in hepatokine Fetuin-A levels are associated with hepatic hypoperfusion and predict cardiac outcomes in patients with heart failure. (In press)

肝因子胎球蛋白-A 水平的降低与肝脏灌注不足相关，可预测心力衰竭患者的心脏结局。

• DOI: 10.1007/s00392-022-02023-0
• 发表时间: 2022
• 期刊: Clinical Research in Cardiology
• 影响因子: 5
• 作者: Tomita Yusuke;Misaka Tomofumi;Yoshihisa Akiomi;Ichijo Yasuhiro;Ishibashi Shinji;Matsuda Mitsuko;Yamadera Yukio;Ohara Himika;Sugawara Yukiko;Hotsuki Yu;Watanabe Koichiro;Anzai Fumiya;Sato Yu;Sato Takamasa;Oikawa Masayoshi;Kobayashi Atsushi;Takeishi Yasuchi
• 通讯作者: Takeishi Yasuchi

Cardiomyocyte N-myristoylation plays an essential role during the development of heart failure

心肌细胞 N-肉豆蔻酰化在心力衰竭的发生过程中发挥重要作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Yusuke Tomita;Tomofumi Misaka;Fumiya Anzai;Shohei Ichimura;Kento Wada;Yusuke Kimishima;Yasuchika Takeishi
• 通讯作者: Yasuchika Takeishi