ネクロプトーシス実行因子MLKLを標的とした心不全治療の開発

针对坏死性凋亡执​​行因子MLKL的心力衰竭治疗方法的开发

• 批准号: 22K08189
• 负责人: 矢野 俊之
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Sapporo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08189/
• 关键词: 拡張型心筋症; 心不全; ネクロプトーシス; MLKL; 細胞死; mTOR

1. 拡張型心筋症 (DCM) 56例を対象とし、ネクロプトーシスシグナル活性化の指標として、心筋生検標本における心筋細胞リン酸化MLKLの発現量を免疫染色で定量的に解析した。全死亡および心不全・心室性不整脈による再入院をイベントと定義した。リン酸化MLKLは心筋細胞の核、細胞質および介在板に観察され、特に歪な形態の肥大した核にリン酸化MLKLが顕著に発現していた。追跡期間の中央値は3.5年間で、イベントが発生したのは10症例（18%）であった。イベント発生率は、総リン酸化MLKLおよび介在板リン酸化MLKL高値群と低値群の間では差はなかったが、核リン酸化MLKL高値群において低値群より高値であった（32% vs. 4%、p=0.012）。生存曲線解析における無イベント発生率は核リン酸化MLKL高値群において低値群より有意に低値であったが（68% vs. 96%、p=0.019）、総リン酸化MLKLおよび介在板リン酸化MLKL発現高値群と低値群の間に差はなかった。2. δサルコグリカン欠損マウスでは左室拡大および置換性線維化を伴う左室駆出率減少が認められ、ヒトDCMと類似していた。総リン酸化MLKL発現率および核リン酸化MLKL発現率は野生型マウスと比較してδサルコグリカン欠損マウスで有意に高値であった。3. ラットMLKLのNuclear Export Signal(NES)機能欠失型変異体を作成しH9c2ラット心筋芽細胞に導入することにより、核MLKL過剰発現とネクロプトーシスの関連を検証した。MLKLの核排出抑制による核への蓄積により、RIP1/RIP3非依存性のネクロプトーシスが誘導された。拡張型心筋症における核MLKL増加は心筋細胞のネクロプトーシスを誘導し、末期心不全への進行に寄与することが示唆された。

1. 56 cases of dilated cardiomyopathy (DCM) were analyzed quantitatively by immunostaining for MLKL expression in cardiac muscle cells. Total death, cardiac insufficiency, ventricular arrhythmia, re-admission, etc. Acidified MLKL is found in the nucleus, cytoplasm and medium of cardiac muscle cells. During the tracking period, 10 cases (18%) occurred. The difference between the high and low value groups of MLKL and the high and low value groups of MLKL (32% vs. 4%, p=0.012). The survival curve analysis shows that the occurrence rate of MLKL is higher than that of MLKL (68% vs. 96%, p=0.019), and the occurrence rate of MLKL is higher than that of MLKL (68% vs. 96%, p=0.019). 2.δThe MLKL occurrence rate is higher than that of wild type. 3. The relationship between MLKL Nuclear Export Signal(NES) dysfunctional variant production and nuclear MLKL gene expression was examined. MLKL nuclear efflux inhibition, nuclear accumulation, RIP1/RIP3 independent reproduction and induction The increase of MLKL in TCD induced the development of cardiac muscle cells and the development of cardiac insufficiency.

项目成果

Nuclear translocation of MLKL enhances necroptosis by a RIP1/RIP3-independent mechanism in H9c2 cardiomyoblasts.

MLKL 的核转位通过 RIP1/RIP3 独立机制增强 H9c2 心肌细胞中的坏死性凋亡。

• DOI: 10.1016/j.jphs.2022.12.009
• 发表时间: 2023
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ino S;Yano T;Kuno A;Tanno M;Kouzu H;Sato T;Yamashita T;Ohwada W;Osanami A;Ogawa T;Toda Y;Shimizu M;Miura T.
• 通讯作者: Miura T.

Enhanced nuclear localization of MLKL promotes necroptosis of cardiomyocytes and predicts prognosis in dilated cardiomyopathy.

MLKL 增强的核定位可促进心肌细胞坏死性凋亡并预测扩张型心肌病的预后。

• 发表时间: 2023
• 作者: YanoT;Fujita Y;Ino S;Ohwada W;Kouzu H;Kuno A;Tanno M;Furuhashi M;Miura T.
• 通讯作者: Miura T.