COPD病態におけるオートファジーとガレクチン8の役割の全体像の解明

阐明自噬和半乳糖凝集素 8 在 COPD 病理学中的总体作用

• 批准号: 22K08243
• 负责人: 河野 雄太
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08243/
• 关键词: Galectin-8; オートファージ; 喫煙; マクロファージ; オートファジー

COPD病態の本態は主に喫煙による慢性末梢気道炎症であるが、末梢気道炎症に細胞老化、アポトーシス、下気道感染などが複合的に病態形成に関与する。我々は、喫煙刺激がマクロファージのオートファジーを障害し、ガレクチン8の分泌を誘導することを見出している。実際、ガレクチン8はCOPDの肺で発現が亢進しており、ガレクチン8が気道上皮細胞のIL-6産生や非アポトーシス細胞死を誘導することを確認している。しかし、COPD病態における、ガレクチン8の役割の全体像は十分に解明されていない。本研究は、①喫煙刺激によるオートファジー障害のガレクチン8分泌亢進メカニズム、②ガレクチン8の細胞老化への関与、③ガレクチン8による非アポトーシス細胞死のメカニズムに注目し、ガレクチン8の役割の全体像を解明することを目的としている。2022年度は①の喫煙刺激によるオートファジー障害のガレクチン8分泌亢進メカニズムを中心にPMAでマクロファージ様に分化させたU937細胞(PMA-U937)とタバコ抽出液(CSE)を用いて検討を行った。オートファジーは、細胞外小胞(EV)の分泌に関与されていることが報告されているため、CSEで刺激したPMA-U937の培養上清中に含まれるEVを超遠心法で採取し、解析を行った。EVの分泌量はEV分画のCD63の発現やナノトラッキング法を用いて検証したが、EVの分泌はCSEの濃度依存性に亢進した。また、EV内にガレクチン8が存在することが確認したが、高濃度のCSEでは、EV内のガレクチン8はむしろ減少した。今後、EV以外の経路も、オートファジーと小胞輸送に注目し検証していく予定である。

The pathological nature of COPD is mainly caused by smoking, chronic peripheral tract inflammation, cell aging, peripheral tract inflammation, and lower tract infection, which are combined to form pathological conditions. I am 々は, smoking is stimulating がマクロファージのオートファジーを barrier Harmful し, ガレクチン8の secretion を induced することを见出している.実记、ガレクチン8はCOPDのpulmonary disease is now hyperactiveしており、ガレクチン8が気道The production of IL-6 in epithelial cells is not induced by the induction of cell death and is confirmed by the detection of IL-6.しかし, COPD morbid における, ガレクチン8のservice cut のwhole image は十多に解明されていない. In this study, ①Smoking stimulates and harms the effects of smoking 8 Hypersecretion is related to cell aging, ②ガレクチン8のcell aging, ③ガレクチン8による Non-アポトーシス Cell DeathのメカニズムにAttentionし、 The overall image of the ガレクチン8のservice cut is することをpurpose and としている. 2022は①のSmoking stimulates the irritation of cigarettes The PMA-U937 cells (PMA-U937) and PMA-U937 cells were differentiated using PMA-U937 extracts (CSE).オートファジーは、Extracellular vesicle (EV) secretion and されていることが report されているため、CS The culture supernatant of E-stimulated PMA-U937 contains EV and is collected and analyzed by ultra-telecentric method. The amount of EV secretion is divided into CD63 and the method is used to detect the secretion of EV, and the secretion of EV is concentration-dependent and hyperactive in CSE.また、EV internal にガレクチン8がexistence することがconfirm したが、high concentration のCSEでは、EV internal のガレクチン8はむしろreduce した. From now on, it will be determined whether there will be any other roadmaps other than EV and the transmission of small cells.