初代培養した癌関連線維芽細胞の分子間相互作用による癌増殖／浸潤メカニズムの解明

通过原代培养的癌症相关成纤维细胞中的分子间相互作用阐明癌症生长/侵袭机制

• 批准号: 22K08245
• 负责人: 平松 範子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Fujita Health University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08245/
• 关键词: 非小細胞肺癌; 癌関連線維芽細胞; CAF; 単球; iPS細胞; 血管内皮細胞; 不死化細胞

本研究は、非小細胞肺癌（NSCLC）患者の癌組織から分離した癌細胞および癌関連線維芽細胞（cancer associated fibroblast：CAF）を培養して、iPS細胞作製技術を応用したCAFの由来細胞の検証、増殖制御可能なTet-On不死化技術を応用した特異的CAFマーカーの探索、遺伝子工学的なCAFマーカーの発現変化によるNSCLC細胞の増殖・浸潤への影響の検討、さらにiPS細胞由来リンパ球との共培養による癌細胞のviabilityに関するCAFの影響を検討して、プレシジョン医療への応用をめざす橋渡し研究である。令和4年度の研究実績として、NSCLC患者の手術検体を材料として半年以上の継代維持が可能な癌細胞株の樹立、および同一患者の末梢血から単球を分離して単球由来iPS細胞（M-iPS細胞）の作製に成功した。このM-iPS細胞を血管内皮細胞および線維芽細胞に分化誘導し、セルカルチャーインサートを用いた癌細胞との共培養実験を行った。血管内皮細胞への分化誘導時に癌細胞と共培養することでCAFマーカーの1つであるα-SMA遺伝子の発現が増加した。癌細胞と共培養したM-iPS細胞由来血管内皮細胞を用いてin vitro血管チューブを形成させたところ、癌細胞と共培養していない条件に比べて、チューブ構造の分岐数が多く観察され、血管新生に関与するマーカーであるDLL4、LPAR4、LPAR6遺伝子の発現が増加した。また、癌細胞についてもM-iPS細胞由来血管内皮細胞と共培養することで、癌幹細胞マーカーであるEpCAM、CD44遺伝子の発現が増加した。本結果より、癌細胞から分泌される液性因子により間接的に血管内皮細胞からCAFに形質転換される可能性が示唆された。また、血管内皮細胞およびCAFから分泌される液性因子が癌幹細胞の生存維持に関わる可能性が示唆された。

This study isolated cancer cells and cancer-associated germ cells from cancer tissues of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC)（cancer associated fibroblast： CAF) culture, iPS cell production technology, CAF origin cell identification, proliferation control, Tet-on-morphogenetic technology, CAF specific exploration, genetic engineering, CAF development, NSCLC cell proliferation, infiltration, etc. The study on the influence of CAF on the viability of cancer cells in co-culture of iPS cells and its application in medical treatment The results of this study in 2010 and 2014 show that the maintenance of tumor cell lines in NSCLC patients after surgery for more than half a year is possible, and the isolation of cells from peripheral blood of the same patient is successful. The M-iPS cells were induced to differentiate into vascular endothelial cells and vascular germ cells, and co-cultured with cancer cells When vascular endothelial cells are induced to differentiate, the expression of α-SMA gene increases in co-culture of cancer cells. Cancer cells co-cultured with M-iPS cells derived from vascular endothelial cells were used in vitro vascular endothelial cell formation, cancer cells co-cultured with M-iPS cells under different conditions, and the number of differentiation of vascular endothelial cells was observed. The development of DLL4, LPAR4, and LPAR6 genes was increased. The development of EpCAM and CD44 genes in cancer stem cells is increasing. These results suggest that the secretion of these cytokines by cancer cells may be related to the development of CAF in vascular endothelial cells. The possibility of secretion of cytokines by vascular endothelial cells and CAF in maintenance of cancer stem cells is discussed.

项目成果

バイオリソース・臨床情報の利活用促進を目指したプラットフォームの構築

搭建促进生物资源和临床信息利用的平台

• 发表时间: 2021
• 作者: 盛永 敬郎;久保 秀司;関根 郁夫;多田 裕司;島田 英昭;平松範子
• 通讯作者: 平松範子

藤田医科大学バイオリソース室

藤田保健大学生物资源办公室

Iris-derived induced pluripotent stem cells that express GFP in all somatic cells of mice and differentiate into functional retinal neurons

• DOI: 10.1007/s00795-022-00330-z
• 发表时间: 2022-08-06
• 期刊: MEDICAL MOLECULAR MORPHOLOGY
• 影响因子: 1.8
• 作者: Hiramatsu，Noriko;Yamamoto，Naoki;Imaizumi，Kazuyoshi
• 通讯作者: Imaizumi，Kazuyoshi

Function of mitochondrial cytochrome c oxidase is enhanced in human lens epithelial cells at high temperatures

高温下人晶状体上皮细胞线粒体细胞色素c氧化酶的功能增强

• DOI: 10.3892/mmr.2022.12906
• 发表时间: 2022
• 期刊: Molecular Medicine Reports
• 影响因子: 3.4
• 作者: Takeda Shun;Yamamoto Naoki;Nagai Noriaki;Hiramatsu Noriko;Deguchi Saori;Hatsusaka Natsuko;Kubo Eri;Sasaki Hiroshi
• 通讯作者: Sasaki Hiroshi

医薬品の生殖毒性試験代替法に有用なヒト由来iPS細胞レポーター細胞株の作製と評価に関する研究

人源 iPS 细胞报告细胞系的生产和评估可作为药物生殖毒性测试的替代方法

• 发表时间: 2022
• 作者: 山本 直樹;平松 範子;加藤 由布;西川 千恵子;横井 友香;足利 太可雄;小島 肇
• 通讯作者: 小島 肇