Type2 サイトカイン関連皮膚疾患におけるガレクチン－７の生理機能の解明

１）アトピー性皮膚炎（atopic dermatitis: AD）動物モデルとして、C57BL/6J(B6)マウス皮膚にカルシポトリオール（MC903）の連日塗布誘発ADモデルを用いてガレクチン-7（Galectin-7: Gal7）の表皮角化細胞における発現動態を解析した。その結果、ADモデルにおけるGal7発現は人と同様、表皮角化細胞間に認められることを確認できた。また、コントロールと比較して、MC903塗布群において、血漿Gal7値と血漿IgE値の上昇も認めた。同様の結果は、NC/Ngaマウス皮膚へのダニ虫体成分を含む軟膏（ビオスタAD）塗布群でも確認できた。２）次に我々は、CRISPR/Cas9を用いてGal7欠損マウスを作成することに成功した。作成したGal7欠損マウス並びに野生型を用いて、MC903を耳介と背部皮膚にそれぞれ11日間塗布し皮膚炎を誘発したのち、耳介の厚さ、背部皮膚における経皮的水分蒸散量（Transepidermal Water Loss：TEWL）、そして組織学的な表皮の厚さをそれぞれ測定した。Gal7欠損マウスにおいて皮膚炎を誘導すると、耳介の組織学的な肥厚ならびにTEWLが野生型よりも亢進する傾向を認めた。つまり、Gal7が欠損した状態では、ADの病態が悪化する傾向にあることが示唆された。３）一方、マウスリンパ腫細胞株(EL4)を用いたGal7の腫瘍細胞への生理活性を評価した。Recommbinant mouse Gal7のEL4細胞におけるPMA誘導性IL-4／IL-13産生能（ELISA法）、細胞増殖（CCK8法）、アポトーシス（AnnexinV/7-AADによるフローサイトメトリー法）を評価したが、特に有意な結果は得られなかった。

１）アトピー性皮膚炎（atopic dermatitis: AD）動物モデルとして、C57BL/6J(B6)マウス皮膚にカルシポトリオール（MC903）の連日塗布誘発ADモデルを用いてガレクチン-7（Galectin-7: Gal7）の表皮角化細胞における発現動態を解析した。その結果、ADモデルにおけるGal7発現は人と同様、表皮角化細胞間に認められることを確認できた。また、コントロールと比較して、MC903塗布群において、血漿Gal7値と血漿IgE値の上昇も認めた。同様の結果は、NC/Ngaマウス皮膚へのダニ虫体成分を含む軟膏（ビオスタAD）塗布群でも確認できた。２）次に我々は、CRISPR/Cas9を用いてGal7欠損マウスを作成することに成功した。作成したGal7欠損マウス並びに野生型を用いて、MC903を耳介と背部皮膚にそれぞれ11日間塗布し皮膚炎を誘発したのち、耳介の厚さ、背部皮膚における経皮的水分蒸散量（Transepidermal Water Loss：TEWL）、そして組織学的な表皮の厚さをそれぞれ測定した。Gal7欠損マウスにおいて皮膚炎を誘導すると、耳介の組織学的な肥厚ならびにTEWLが野生型よりも亢進する傾向を認めた。つまり、Gal7が欠損した状態では、ADの病態が悪化する傾向にあることが示唆された。３）一方、マウスリンパ腫細胞株(EL4)を用いたGal7の腫瘍細胞への生理活性を評価した。Recommbinant mouse Gal7のEL4細胞におけるPMA誘導性IL-4／IL-13産生能（ELISA法）、細胞増殖（CCK8法）、アポトーシス（AnnexinV/7-AADによるフローサイトメトリー法）を評価したが、特に有意な結果は得られなかった。