Type2 サイトカイン関連皮膚疾患におけるガレクチン－７の生理機能の解明

阐明半乳糖凝集素7在2型细胞因子相关皮肤病中的生理功能

• 批准号: 22K08402
• 负责人: 島内 隆寿
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08402/
• 关键词: ガレクチン-7; アトピー性皮膚炎; 表皮角化細胞; type2 サイトカイン; ガレクチン－７; 皮膚リンパ腫

１）アトピー性皮膚炎（atopic dermatitis: AD）動物モデルとして、C57BL/6J(B6)マウス皮膚にカルシポトリオール（MC903）の連日塗布誘発ADモデルを用いてガレクチン-7（Galectin-7: Gal7）の表皮角化細胞における発現動態を解析した。その結果、ADモデルにおけるGal7発現は人と同様、表皮角化細胞間に認められることを確認できた。また、コントロールと比較して、MC903塗布群において、血漿Gal7値と血漿IgE値の上昇も認めた。同様の結果は、NC/Ngaマウス皮膚へのダニ虫体成分を含む軟膏（ビオスタAD）塗布群でも確認できた。２）次に我々は、CRISPR/Cas9を用いてGal7欠損マウスを作成することに成功した。作成したGal7欠損マウス並びに野生型を用いて、MC903を耳介と背部皮膚にそれぞれ11日間塗布し皮膚炎を誘発したのち、耳介の厚さ、背部皮膚における経皮的水分蒸散量（Transepidermal Water Loss：TEWL）、そして組織学的な表皮の厚さをそれぞれ測定した。Gal7欠損マウスにおいて皮膚炎を誘導すると、耳介の組織学的な肥厚ならびにTEWLが野生型よりも亢進する傾向を認めた。つまり、Gal7が欠損した状態では、ADの病態が悪化する傾向にあることが示唆された。３）一方、マウスリンパ腫細胞株(EL4)を用いたGal7の腫瘍細胞への生理活性を評価した。Recommbinant mouse Gal7のEL4細胞におけるPMA誘導性IL-4／IL-13産生能（ELISA法）、細胞増殖（CCK8法）、アポトーシス（AnnexinV/7-AADによるフローサイトメトリー法）を評価したが、特に有意な結果は得られなかった。

1) Analysis of the development dynamics of epidermal keratinocytes in atopic dermatitis (AD) animal model C57BL/6J (B6) and its skin model MC903. The results of AD and Gal7 show that there is no difference between human and epidermal keratinocytes. Comparison of MC903 coating, plasma gal7 and plasma IgE values The same results were obtained for NC/Nga skin coating and insect composition. 2) CRISPR/Cas9 is used to create The results showed that Gal7 was deficient and wild type, MC903 was used in ear and back skin, and 11 days after application, Transepidermal Water Loss (TEWL) and histological thickness of epidermis were measured. Gal-7 deficiency in dermatitis induced by ototoxicity and the tendency to increase in TEWL Gal7 is in a state of deficiency and AD is prone to degeneration. 3) The physiological activity of Gal7 cells was evaluated by using one of the three methods: PMA-induced IL-4/IL-13 production in EL4 cells of Reconbinant mouse Gal7 was evaluated by ELISA, cell proliferation by CCK8, and apoptosis by Annexin V/7-AAD.