Attempt to develop novel treatment for skin pigmentation by analyzing the formation of melanophages

真皮に形成されメラニン色素を貯留したメラノファージによる、除去困難な色素沈着（シミ）を、効率的にリンパ節などへ輸送、排出する方法を探索するため、真皮の樹状細胞やマクロファージが、皮膚メラニンの捕捉や輸送にどのように関与するのかを探索することが具体的な研究目的である。中でも自己抗原の捕捉に優れる古典的樹状細胞１型（cDC1）に着目し進めている。令和4年度は、皮膚色素細胞増多症マウス２系統（Kitl-Tg、HGF-Tg）を新たに無菌化導入し、cDC1が蛍光マークされ、かつジフテリア毒素投与で特異的に除去できるXcr1-DTR-venusマウスと交配した二重変異体マウスにより、メラニンを含んだ真皮cDC1を蛍光で検出すること、および効率の良いcDC1除去の条件検討を進めた。二重変異体マウス作成の間は、Xcr1マウス単体でフローサイトメトリーによる条件検討を進め、CD11c陽性MHC classII陽性細胞を基本に、CD8a、CD103、CD11b、CD4などの発現によるXcr1陽性cDC1のキャラクターを再確認した。さらに免疫組織染色でも確認を進める。また本実験では、皮膚所属リンパ節に輸送されるメラニン量を、cDC1除去前後で比較するため、長期間のジフテリア毒素投与が必要になる。ジフテリア毒素が過量になるとマウスが死ぬため、cDC1が除去されマウスが生存できる投与量と期間の条件検討を進め、致死に至らない量で、2週間程度の継続が可能であることを確認している。今後さらに長期間の投与を検討する。この時のXcr1陽性cDC1の減少は皮膚所属リンパ節で確認しており、皮膚そのものでの細胞数変化をさらに進める。

真皮に形成されメラニン色素を貯留したメラノファージによる、除去困難な色素沈着（シミ）を、効率的にリンパ節などへ輸送、排出する方法を探索するため、真皮の樹状細胞やマクロファージが、皮膚メラニンの捕捉や輸送にどのように関与するのかを探索することが具体的な研究目的である。中でも自己抗原の捕捉に優れる古典的樹状細胞１型（cDC1）に着目し進めている。令和4年度は、皮膚色素細胞増多症マウス２系統（Kitl-Tg、HGF-Tg）を新たに無菌化導入し、cDC1が蛍光マークされ、かつジフテリア毒素投与で特異的に除去できるXcr1-DTR-venusマウスと交配した二重変異体マウスにより、メラニンを含んだ真皮cDC1を蛍光で検出すること、および効率の良いcDC1除去の条件検討を進めた。二重変異体マウス作成の間は、Xcr1マウス単体でフローサイトメトリーによる条件検討を進め、CD11c陽性MHC classII陽性細胞を基本に、CD8a、CD103、CD11b、CD4などの発現によるXcr1陽性cDC1のキャラクターを再確認した。さらに免疫組織染色でも確認を進める。また本実験では、皮膚所属リンパ節に輸送されるメラニン量を、cDC1除去前後で比較するため、長期間のジフテリア毒素投与が必要になる。ジフテリア毒素が過量になるとマウスが死ぬため、cDC1が除去されマウスが生存できる投与量と期間の条件検討を進め、致死に至らない量で、2週間程度の継続が可能であることを確認している。今後さらに長期間の投与を検討する。この時のXcr1陽性cDC1の減少は皮膚所属リンパ節で確認しており、皮膚そのものでの細胞数変化をさらに進める。