Attempt to develop novel treatment for skin pigmentation by analyzing the formation of melanophages

尝试通过分析噬黑素细胞的形成来开发治疗皮肤色素沉着的新方法

• 批准号: 22K08431
• 负责人: 吉野 三也
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08431/
• 关键词: 真皮樹状細胞; マクロファージ; 皮膚所属リンパ節; メラニン; 樹状細胞; 皮膚; 色素沈着; 抗原輸送

真皮に形成されメラニン色素を貯留したメラノファージによる、除去困難な色素沈着（シミ）を、効率的にリンパ節などへ輸送、排出する方法を探索するため、真皮の樹状細胞やマクロファージが、皮膚メラニンの捕捉や輸送にどのように関与するのかを探索することが具体的な研究目的である。中でも自己抗原の捕捉に優れる古典的樹状細胞１型（cDC1）に着目し進めている。令和4年度は、皮膚色素細胞増多症マウス２系統（Kitl-Tg、HGF-Tg）を新たに無菌化導入し、cDC1が蛍光マークされ、かつジフテリア毒素投与で特異的に除去できるXcr1-DTR-venusマウスと交配した二重変異体マウスにより、メラニンを含んだ真皮cDC1を蛍光で検出すること、および効率の良いcDC1除去の条件検討を進めた。二重変異体マウス作成の間は、Xcr1マウス単体でフローサイトメトリーによる条件検討を進め、CD11c陽性MHC classII陽性細胞を基本に、CD8a、CD103、CD11b、CD4などの発現によるXcr1陽性cDC1のキャラクターを再確認した。さらに免疫組織染色でも確認を進める。また本実験では、皮膚所属リンパ節に輸送されるメラニン量を、cDC1除去前後で比較するため、長期間のジフテリア毒素投与が必要になる。ジフテリア毒素が過量になるとマウスが死ぬため、cDC1が除去されマウスが生存できる投与量と期間の条件検討を進め、致死に至らない量で、2週間程度の継続が可能であることを確認している。今後さらに長期間の投与を検討する。この時のXcr1陽性cDC1の減少は皮膚所属リンパ節で確認しており、皮膚そのものでの細胞数変化をさらに進める。

该具体研究旨在探讨真皮中的树突状细胞和巨噬细胞如何参与皮肤黑色素的捕获和运输，以找到有效地运输和排泄色素沉着（斑点）的方法，这些方法难以从模子中形成的黑色噬菌体中去除并储存在dermis中，以使其储存在dermis and lymph nodes和其他部分。其中，我们专注于经典的树突状细胞类型1（CDC1），它在捕获自身抗原方面非常出色。在2022年，两只小鼠皮肤色素增生小鼠（奇特尔-TG，HGF-TG）是新的无菌并引入的，并且与XCR1-DTR-Venus小鼠杂交Cdc1，这些小鼠被荧光繁殖到荧光中，可以通过给予diphtheria diphtheria doxin和CDC1进行了调整，并可以通过使用Diphtheria diphtheria cdc1进行了专门去除CDC1。在创建双突变小鼠期间，单独通过流式细胞仪检查XCR1小鼠，并根据CD8A，CD103，CD11b，CD4等的表达来确认XCR1阳性CDC1特征，该特征基于CD11C阳性MHC II类II类阳性细胞。此外，我们将继续进行免疫组织化学染色。此外，在这项实验中，需要长期给予白喉毒素，以比较去除CDC1之前和之后转运到皮肤区域淋巴结的黑色素量。如果白喉毒素过多，小鼠将死亡，并且可以去除CDC1的剂量和持续时间的状况，并研究了小鼠可以生存的，我们已经确认可以以无致命的数量继续持续约两个星期。将来，我们将考虑更长的时间管理。此时XCR1阳性CDC1的降低在皮肤区域淋巴结中得到了证实，进一步增加了皮肤本身细胞计数的变化。

项目成果

准教授 吉野三也（免疫学分野）｜鳥取大学医学部生命科学科

鸟取大学医学院生命科学系副教授三亚吉野（免疫学系）

免疫学分野｜鳥取大学医学部生命科学科

免疫学｜鸟取大学医学院生命科学系