後天性・血栓性血小板減少性紫斑病の動物モデルの作成

血栓性血小板減少性紫斑病(TTP)には先天性と後天性があり、後天性TTPはADAMTS13に対する自己抗体が産生されることで発症する致死的血栓症である。無治療の場合は90%以上の症例が死亡するが、血漿交換を実施することで80%以上の生存が得られるようになった。我々の日本人での集計では、１年生存率が84%であるが、逆に16%の症例が1年以内に死亡していることになる。さらに生存率を上げるために新規薬剤の開発が望まれるが、後天性TTPの治療薬開発のための動物疾患モデルがほとんど存在しなかった。本研究では、小動物モデルとしてマウスモデルを確立すること、大型動物モデルとして我々が作成した抗ADAMTS13モノクローナル抗体A10（特許第4533995号）を用いてカニクイザルモデルを作成することを計画している。マウスモデルを開発する目的は、簡便に安い経費で実験を実施できるようにすることである。サルモデルを作成する目的は、小動物から人間に近い動物種で効果と副作用を確認することである。令和４年度は、マウスADAMTS13のタンパク質発現に関して、ヒトADAMTS13と同様の方法でHEK293細胞を用いて行った。ただし、タンパク質の発現量が実験に使用できるほど十分でなく、発現細胞を変更するなどの検討を行っている。また、使用するADAMTS13ノックアウトマウスとワイルドタイプマウスの飼育を行い、実験に必要なマウス数は準備可能となった。カニクイザルの実験に関して、多量のA10抗体が必要となる。また、投与後可能な限り長期観察を行う必要なので、無菌的な抗体を準備する必要がある。他の研究でGLPグレードのヒト化A10を多量に準備しており、実験に使用する量の確保は可能となった。

血栓性血小板減少性紫斑病(TTP)には先天性と後天性があり、後天性TTPはADAMTS13に対する自己抗体が産生されることで発症する致死的血栓症である。無治療の場合は90%以上の症例が死亡するが、血漿交換を実施することで80%以上の生存が得られるようになった。我々の日本人での集計では、１年生存率が84%であるが、逆に16%の症例が1年以内に死亡していることになる。さらに生存率を上げるために新規薬剤の開発が望まれるが、後天性TTPの治療薬開発のための動物疾患モデルがほとんど存在しなかった。本研究では、小動物モデルとしてマウスモデルを確立すること、大型動物モデルとして我々が作成した抗ADAMTS13モノクローナル抗体A10（特許第4533995号）を用いてカニクイザルモデルを作成することを計画している。マウスモデルを開発する目的は、簡便に安い経費で実験を実施できるようにすることである。サルモデルを作成する目的は、小動物から人間に近い動物種で効果と副作用を確認することである。令和４年度は、マウスADAMTS13のタンパク質発現に関して、ヒトADAMTS13と同様の方法でHEK293細胞を用いて行った。ただし、タンパク質の発現量が実験に使用できるほど十分でなく、発現細胞を変更するなどの検討を行っている。また、使用するADAMTS13ノックアウトマウスとワイルドタイプマウスの飼育を行い、実験に必要なマウス数は準備可能となった。カニクイザルの実験に関して、多量のA10抗体が必要となる。また、投与後可能な限り長期観察を行う必要なので、無菌的な抗体を準備する必要がある。他の研究でGLPグレードのヒト化A10を多量に準備しており、実験に使用する量の確保は可能となった。