先端的分子イメージング法を基盤としたBiTE抗体療法の解析

T細胞とがん細胞を架橋し、がん細胞を傷害する二重特異性T細胞誘導 (Bispecific T-cell Engager: BiTE) 抗体を用いたがん免疫療法は、臨床現場で有用性を示しているが、T細胞がどのように活性化され腫瘍を殺すのかという作用機序について未だ不明な点がある。本研究を遂行するため、抗hCD19/hCD3 BiTE抗体によるT細胞の活性化を1細胞1分子観察するシステムを確立した。がん抗原 (hCD19) を提示できる平面脂質二重膜を作成し、Jurkat T細胞、および、ヒト末梢血から調整したT細胞を用いて、BiTE抗体によるT細胞の活性化をTCRマイクロクラスターの形成を指標として可視化することに成功した。さらに、蛍光ラベルしたBiTE抗体を用いることによって、TCRマイクロクラスターとBiTEが確かに共局在することを確認した。また、抗原-TCRを介したT細胞の活性化と同様、BiTE抗体によるT細胞の活性化においても、TCRマイクロクラスターの形成の後、ICAM-1に囲まれたcSMACの形成を観察している。次に、本研究で解決すべきテーマの一つである、BiTE抗体によって惹起されるT細胞の活性化において、補助受容体シグナルの寄与について検討した。その結果、hCD19に加えてCD80存在下では活性型補助刺激受容体CD28がBiTE作用時にはTCRと共局在し、IL-2産生を上昇させることが判明した。一方、PD-L1存在下では抑制型補助刺激受容体PD-1がBiTE作用時にはTCRと共局在し、IL-2産生を抑制することが判明した。また、この抑制は抗PD-1抗体によって解除できることを確認した。

T細胞とがん細胞を架橋し、がん細胞を傷害する二重特異性T細胞誘導 (Bispecific T-cell Engager: BiTE) 抗体を用いたがん免疫療法は、臨床現場で有用性を示しているが、T細胞がどのように活性化され腫瘍を殺すのかという作用機序について未だ不明な点がある。本研究を遂行するため、抗hCD19/hCD3 BiTE抗体によるT細胞の活性化を1細胞1分子観察するシステムを確立した。がん抗原 (hCD19) を提示できる平面脂質二重膜を作成し、Jurkat T細胞、および、ヒト末梢血から調整したT細胞を用いて、BiTE抗体によるT細胞の活性化をTCRマイクロクラスターの形成を指標として可視化することに成功した。さらに、蛍光ラベルしたBiTE抗体を用いることによって、TCRマイクロクラスターとBiTEが確かに共局在することを確認した。また、抗原-TCRを介したT細胞の活性化と同様、BiTE抗体によるT細胞の活性化においても、TCRマイクロクラスターの形成の後、ICAM-1に囲まれたcSMACの形成を観察している。次に、本研究で解決すべきテーマの一つである、BiTE抗体によって惹起されるT細胞の活性化において、補助受容体シグナルの寄与について検討した。その結果、hCD19に加えてCD80存在下では活性型補助刺激受容体CD28がBiTE作用時にはTCRと共局在し、IL-2産生を上昇させることが判明した。一方、PD-L1存在下では抑制型補助刺激受容体PD-1がBiTE作用時にはTCRと共局在し、IL-2産生を抑制することが判明した。また、この抑制は抗PD-1抗体によって解除できることを確認した。