Research for pathogenesis of psoriatic arthritis and palmoplantar pustulosis osteoarthritis by single-cell analysis in joint inflammation

关节炎症的单细胞分析研究银屑病关节炎和掌跖脓疱病骨关节炎的发病机制

• 批准号: 22K08539
• 负责人: 神田 浩子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08539/
• 关键词: 乾癬性関節炎; 掌蹠膿疱症性骨関節炎; シングルセル解析

令和4年度は、乾癬性関節炎（Psoriatic arthritis: PsA）や掌蹠膿疱症性骨関節炎（Pustulotic arthro-osteitis: PAO、欧米ではSAPHO syndrome）と診断された患者から、研究内容に関して文書説明と同意を取得した。同意が得られた患者から、治療開始前の臨床情報（年齢・性別・疾患活動性評価指標・身体機能障害評価指標・画像による構造的変化・血液検査による炎症所見など）、関節滑膜（超音波ガイド下滑膜針生検などを用いて採取）・末梢血から免疫担当細胞を収集した。細胞懸濁液に、CITE-seq抗体の添加と免疫蛍光染色を施し、フローサイトメーターを用いて生細胞を分取した（1検体あたりの目安: 10,000細胞）。10x Genomics Chromiumシステムを用いてシングルセルライブラリーを調整した。この一連の工程において、データの質の担保とコスト削減の両立を目指すため、プロトコルを改善した。

In the 4th year of Reiwa, や, Psoriatic arthritis (PsA) や Pustulotic arthro-osteitis: PAO, omega で は SAPHO syndrome) と diagnosis さ れ た patients か ら, research content に masato し て letter stating と agrees to acquire を し た. Agree to が ら れ た patients か ら, before the start of treatment の clinical intelligence (価 齢, sex, disease activity evaluation index, body function handicap of review 価 index, portrait に よ る structure, the variations of blood, check 検 に よ る inflammation seen な ど), masato synovial membrane (ultrasound ガ イ ド synovial needle born under 検 な ど を with い て take), peripheral blood か ら bear immune cells を 収 set し た. Cell suspensions に, CITE - seq antibody の add と 蛍 light dye を し, フ ロ ー サ イ ト メ ー タ ー を with い て を born cells divide し た (1 検 body あ た り の orders: 10000 cells). 10x Genomics Chromiumシステムを adjusts た た with システムを てシ グ グ セ セ ラ ラ ブラリ ブラリ を を. こ の for の engineering に お い て, デ ー タ の の quality guarantee と コ ス ト cut の struck made を refers す た め, プ ロ ト コ ル を improve し た.