糖代謝異常の病態形成における2型糖尿病遺伝子UBE2E2の役割

2型糖尿病基因UBE2E2在糖代谢异常发病机制中的作用

• 批准号: 22K08620
• 负责人: 桜井 賛孝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08620/
• 关键词: インスリン分泌; 糖尿病関連遺伝子; ユビキチン; 膵β細胞

【背景と目的】近年のヒトゲノムワイド関連解析(GWAS)の結果、様々な人種・地域における2 型糖尿病の疾患感受性遺伝子が同定されている。そのような中で、2010年に日本人や東アジア人でのみ有意な2型糖尿病遺伝子としてUBE2E2が報告された。UBE2E2はユビキチン修飾系においてユビキチンのキャリアー蛋白として機能する種々のE2の中の一つであるが、その機能に関しては明らかでない点が多く、特に糖代謝制御における役割は全く不明である。そこで、発生工学的手法を用いて膵β細胞特異的UBE2E2トランスジェニックマウス(TGマウス)とUBE2E2全身ノックアウトマウス(KOマウス)を作製し、その表現型を解析することで膵β細胞や各組織でのUBE2E2の役割や、ひいてはユビキチン修飾系と糖尿病の関連を解明することを目的とした。【方法】マウス膵島のmRNA由来のcDNAをもとにUBE2E2蛋白をコードするexon2-6の領域をクローニングし、RIPプロモーター下に配置したコンストラクトを構築しTGマウスを作製した。またexon2の領域にsgRNAを設計してCRISPR-Cas9システムを用いてKOマウスを作製した。【結果】TGマウスは若週齢時よりβ細胞量の低下に伴うインスリン分泌低下の表現型を呈した。また、細胞周期関連因子のp21遺伝子の発現高値と若週齢時や高脂肪食負荷時のβ細胞の増殖能の低下も認めた。プロテアソーム阻害剤処理後のプロテオーム解析では種々のポリユビキチン鎖形成の有意な増加を認め、さらに、阻害剤あり/なしのいずれの条件のプロテオーム解析においても有意に発現増加していたE3リガーゼとしてNedd4が検出された。KOマウスに関しては、数匹のF0世代のマウスを作出した。

Recent background と purpose 】 【 の ヒ ト ゲ ノ ム ワ イ ド masato analytical (GWAS) の results, even others 々 な racial, regional に お け る の type 2 diabetes disease susceptibility heritage 伝 son が be さ れ て い る. そ の よ う な で, 2010 east ア に Japanese や ジ ア people で の み intentionally な traces of type 2 diabetes 伝 son と し て UBE2E2 が report さ れ た. UBE2E2 は ユ ビ キ チ ン modification is に お い て ユ ビ キ チ ン の キ ャ リ ア ー protein と し て function す る kind 々 の E2 in the の の つ で あ る が, そ の function に masato し て は Ming ら か で な い point が く, more に sugar metabolic suppression に お け cut は る service all く unknown で あ る. そ こ で, 発 sangon learn gimmick を with い て Cui beta-cell specific UBE2E2 ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス (TG マ ウ ス) と UBE2E2 systemic ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス (KO マ ウ ス) を as し, そ の phenotype を parsing す る こ と で Cui beta cells や organizations で の UBE2E2 の cut や, ひ い て は ユ ビ キ チ ン Modification: と diabetes <s:1> association を explanation: する とを Objective: と た た. 【 method 】 マ ウ ス Cui island の mRNA origin の cDNA を も と に UBE2E2 protein を コ ー ド す る exon2-6 の field を ク ロ ー ニ ン グ し, RIP プ ロ モ ー タ ー に configuration under し た コ ン ス ト ラ ク ト を build し TG マ ウ ス を cropping し た. ま た exon2 の field に sgRNA を design し て CRISPR - Cas9 シ ス テ ム を with い て KO マ ウ ス を cropping し た. 【 Result 】 If TG 齢 ウス 齢, the amount of よ <s:1> β cells is <s:1> low に accompanied by う <s:1> スリ スリ and <s:1> スリ, and the secretion is also low, the <s:1> phenotype を is た た. When また and the cell cycle-associated factor <s:1> p21 has a high residual 伝 seed <e:1>, it is と. If there is a 齢, や. When there is a high fat food load, the <s:1> β -cell <e:1> proliferation capacity <e:1> is low. It is estimated that めた. プ ロ テ ア ソ ー ム resistance against tonic 処 reason after の プ ロ テ オ ー ム parsing で は kind 々 の ポ リ ユ ビ キ チ ン lock forming の intentionally な raised を recognize め, さ ら に, resistance against tonic あ り / な し の い ず れ の conditions の プ ロ テ オ ー ム parsing に お い て も intentionally に 発 now rights し て い た E3 リ ガ ー ゼ と し て Nedd4 が 検 out さ れ た. KO て ウスに made て た with several <s:1> F0 generation <s:1> ウスを ウスを ウスを.

项目成果

モデルマウスを用いた糖尿病関連遺伝子の機能解析

使用模型小鼠进行糖尿病相关基因的功能分析

• 发表时间: 2022
• 作者: 桜井賛孝;窪田直人;山内敏正
• 通讯作者: 山内敏正

Evaluation of glycated albumin levels in tears and saliva as a marker in patients with diabetes mellitus

• DOI: 10.1016/j.diabres.2023.110637
• 发表时间: 2023-05-05
• 期刊: DIABETES RESEARCH AND CLINICAL PRACTICE
• 影响因子: 5.1
• 作者: Aihara, Masakazu;Jinnouchi, Hideaki;Kubota, Naoto
• 通讯作者: Kubota, Naoto

糖尿病関連遺伝子UBE2E2の膵β細胞における役割

糖尿病相关基因UBE2E2在胰腺β细胞中的作用

• 发表时间: 2021
• 作者: 桜井賛孝;窪田直人;高本偉碩;和田亘弘;林高則;相原允一;窪田哲也;笹子敬洋;門脇孝;山内敏正
• 通讯作者: 山内敏正

インスリンの作用異常と分泌低下がもたらす代謝異常（癌進展に及ぼす影響と分泌低下の機序）

胰岛素作用异常和分泌减少引起的代谢异常（对癌症进展的影响和分泌减少的机制）

• 发表时间: 2022
• 作者: 桜井賛孝;窪田直人;門脇孝;山内敏正
• 通讯作者: 山内敏正