アルドステロン産生腺腫におけるWNTシグナルの新規制御因子に着目した病態解析

病理分析重点关注产醛固酮腺瘤中 WNT 信号传导的新型调节因子

• 批准号: 22K08646
• 负责人: 村上 正憲
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08646/
• 关键词: 内分泌学; 高血圧学; オミクス解析; アルドステロン; 副腎腫瘍

近年のオミクス解析の発展に伴い、アルドステロン産生腺腫（APA）の分子生物学的特徴の理解が進んでいる。ステロイド合成酵素の免疫染色の結果からAPA組織の腫瘍内不均一性が予想されており、APAの発症メカニズムを理解する上で重要と考えられるが、従来のbulk RNA-seqによるアプローチでは詳細な解析が困難であった。今回、Single Nucleus RNA-seq解析（snRNA-seq）を行い、APA特異的なクラスターの抽出とその特徴を解析した。非機能性副腎腫瘍（NF）、APAの2種類の凍結腫瘍検体より核抽出を実施し、FACSで精製を行った。BD Rhapsodyで核とバーコード付きビーズを結合し、逆転写の後にTAS-Seqによるライブラリー調整およびシーケンシングを行い、Seuratで解析を実施した。NF：2188個、APA：3993個の計6181個の核が解析できた。NFとAPAを比較し、アルドステロン合成酵素をマーカーとするAPAに特異的な複数のクラスターを同定した。擬似時系列解析により、それらのクラスター間の関係は、ステロイド合成酵素の発現量に応じた分化度の違いを反映していると推定された。さらにAPA 37症例のbulk RNA-seqのデータを使用し、snRNA-seqに基づきdeconvolution解析によってクラスターの構成を推定したところ、同一の体細胞変異を有するAPA間でもクラスターの構成に不均一性があることがわかった。腫瘍検体を用いたsnRNA-seqはAPAの腫瘍内、並びに腫瘍間不均一性の評価とその病態への関わりの解析に有用である。

In recent years, progress has been made in understanding the molecular biological characteristics of adenomas (APA). The results of immunostaining for these enzymes show that heterogeneity in APA tissue is important for understanding APA development. Detailed analysis is difficult. This time, Single Nucleus RNA-seq analysis (snRNA-seq) is performed, and APA specific features are extracted. Non-functional adrenal cysts (NF), APA 2 types of frozen cysts, nuclear extraction, FACS purification BD Rhapsody's core is composed of TAS-Seq and Seurat. NF: 2188, APA: 3993, 6181 nuclear analysis. APA is the same type of enzyme. The relationship between the expression and the differentiation of the enzyme in the pseudo-time series analysis is reflected in the estimation. For APA 37 cases, bulk RNA-seq is used, SNRNA-seq is used, and the basic deconvolution analysis is used to estimate the composition of the cell. The same somatic cell is different, and the composition of the cell is different. SNRNA-seq is useful in the analysis of tumor heterogeneity within and between APA tumors.

项目成果

Long‐term effects of primary aldosteronism treatment on patients with primary aldosteronism and chronic kidney disease

原发性醛固酮增多症治疗对原发性醛固酮增多症合并慢性肾脏病患者的长期影响

• DOI: 10.1111/cen.14849
• 发表时间: 2022
• 期刊: Clinical Endocrinology
• 影响因子: 3.2
• 作者: Nakano Yujiro;Murakami Masanori;Hara Kazunari;Fukuda Tatsuya;Horino Masato;Takeuchi Akira;Niitsu Yoshihiro;Shiba Kumiko;Tsujimoto Kazutaka;Komiya Chikara;Yokoyama Minato;Ikeda Kenji;Yoshimoto Takanobu;Fujii Yasuhisa;Yamada Tetsuya
• 通讯作者: Yamada Tetsuya

International multicenter survey on screening and confirmatory testing in primary aldosteronism

原发性醛固酮增多症筛查和确证检测的国际多中心调查

• DOI: 10.1093/ejendo/lvac002
• 发表时间: 2023
• 期刊: European Journal of Endocrinology
• 影响因子: 5.8
• 作者: Naruse Mitsuhide;Murakami Masanori;Katabami Takuyuki;Kocjan Tomaz;et al.
• 通讯作者: et al.

右副腎に認められた２つの腺腫で異なるKCNJ5体細胞変異を有した原発性アルドステロン症.

在右肾上腺发现两个腺瘤，具有由原发性醛固酮增多症引起的不同 KCNJ5 体细胞突变。

• 发表时间: 2022
• 作者: 原 一成;村上 正憲;池田 賢司;小宮 力;辻本 和峰;柴 久美子;重松嵩朗; 中村 祐基; 藤井 靖久;小柳 杏莉;山本 浩平;明石 巧;山田 哲也.
• 通讯作者: 山田 哲也.

再発時にMIBGシンチグラフィ陰性となったパラガングリオーマの一例.

复发时 MIBG 闪烁扫描呈阴性的副神经节瘤病例。

• 发表时间: 2022
• 作者: 村田 真麻;村上 正憲;原 一成;平野 瑛子;兼田 稜;柴 久美子;辻本 和峰;小宮力;池田 賢司;新宅 洋;大野 十央;朝蔭 孝宏;横山 みなと;藤井 靖久;山田 哲也.
• 通讯作者: 山田 哲也.

In Situ Metabolomics of Cortisol-Producing Adenomas.

• DOI: 10.1093/clinchem/hvac191
• 发表时间: 2023-02-01
• 期刊: Clinical chemistry
• 影响因子: 9.3