Biosynthesis of bet-alanine in autolysosomes.

自溶酶体中 β-丙氨酸的生物合成。

• 批准号: 22K08681
• 负责人: 上野 隆
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08681/
• 关键词: ピリミジン分解; ジヒドロウラシルデヒドロゲナーゼ; ウレイドプロピオナ－ゼ; β－アラニン; オートファジー; オートリソソーム; アミノ酸代謝; アミノ酸輸送

タンパク分解に由来しないアミノ酸であるβ－アラニンが肝臓のリソソームに多く貯留するメカニズムを明らかにするのが研究目的である。β－アラニンはウラシルから2段階の酵素反応（ジヒドロウラシルデヒドロゲナーゼおよびβウレイドプロピオナ－ゼ）で、それぞれジヒドロウラシル、ウレイドプロピオン酸（UPA）を経て生成する。先行する基盤研究C（課題番号18K08528）では、主として培養細胞を用いて前駆体であるウラシルやUPAを培地に加えてβ－アラニンの生成が増大するか、またβ－アラニンがリソソームに取り込まれるかの解析を試みた。しかし、そもそも48時間までの培養で細胞のβ－アラニンは高々20%程度が増える程度でコントロールと有意差も認められなかった。また、14C－β－アラニンを用いたリソソームへの輸送反応も今のところ捉えられていない。リソソームへのβ－アラニン輸送を調べる過程で、ジヒドロウラシルデヒドロゲナーゼとβウレイドプロピオナ－ゼは選択的オートファジー基質としてオートリソソームに取り込まれることを見出した。そこで本基盤研究ではオートリソソームに取り込まれたβ－アラニン生成酵素によってβ－アラニンが生成し、結果的に（オート）リソソームに貯留するという仮説の基に研究を開始した。研究初年度ではオートファジーを活性化させた条件下で培養細胞のβ－アラニンレベルが上昇し、逆にオートファジーを阻害する条件下では減少するかに焦点を絞って解析を試みた。まずβ－アラニンをより感度良く定量する方法としてcapillary-electrophoresis mass spectrometry（CE-MS）を導入し、まずウラシル、UPA、β－アラニンを分別検出する条件を確立した。次にオートファジーを誘導する条件や阻害する条件で細胞全体のβ－アラニンが変動するかを調べたが、今のところ上記仮説は支持されていない

The reason for the decomposition is that there is no acid in the liver, the liver and the liver. There are two segments of β-lactamase, β-lactic acid, acid (UPA) and so on. First of all, the basic research C (project serial number 18K08528), and the main body of the cell will be used to prepare the UPA. Add the β-cell to generate a large number of samples, which will be used to analyze the data. During the 48-hour cycle, the β-cell is 20% higher than the normal level, the level of the cell is 20% higher than that of the control, and the degree of the disease is 20% higher than that of the others. This is the first time that 14C-β-currency has been sent back to you in the first place. Please tell me that you are not in the process of receiving information, and that you are not in the process of receiving information. This is the first time that you have selected any information that you need to know. In this basic study, we did a lot of research on the enzyme production of β-phenotypic acid, the production of β-lactamase, and the results of this study. The purpose of this study is to study how to increase the number of cells under the condition of activation in the first year of the study. in the first year of the study, under the condition of activation in the first year of the study, under the condition of activation in the first year of the study, under the condition of cell culture, β-cell, β-cell, β-cell, anti-cell, anti-damage, anti-damage The method of quantitative analysis of β-phenotypic acid sensitivity was used to determine the accuracy of capillary-electrophoresis mass spectrometry (CE-MS) input, UPA, β-phenotypic acid respectively. In the second half of the year, the conditions were blocked and the conditions were blocked. All the β-rings in the cell were not affected. Today, we are in support of the conditions.