New treatment methods for liver failure by human iPS cells

人类iPS细胞治疗肝衰竭的新方法

• 批准号: 22K08735
• 负责人: 吉住 朋晴
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08735/
• 关键词: 人工肝臓; iPS細胞; 肝臓; ラット; 肝不全; 肝移植

肝不全に対する唯一の根治的治療である肝移植医療において、グラフト不足と肝移植後拒絶反応が解決すべき問題である。本邦では主に生体肝移植が施行されているが、グラフト容積不足によって引き起こされる過小グラフト症候群は術後生存率を大きく低下させる。患者本人の細胞からiPS肝細胞(iPS-Heps)を作成し、それを肝移植と組み合わせることで、グラフト不足や過小グラフト症候群を克服できる可能性がある。これまでにiPS細胞からiPS-Hepsを作成する方法は報告されているが、肝不全患者の救出には多量の肝細胞の培養が必要であるが、これまでにiPS-Hepsを大量培養できていない。我々は、iPS細胞から分化させた星細胞(iPS-Stellates)と共培養することで、iPS-Hepsをより分化させ、増殖させることができた。今回の目的は、iPS-Stellatesを共培養することによるiPS-Hepsを分化させ、増殖させるメカニズムを明らかにし、iPS-Hepsを大量培養させる方法を確立することである。本研究の今年度までの成果を報告する。iPS細胞より肝細胞の誘導・分化を行った。誘導したiPS由来肝細胞はヒト正常肝細胞と比較しHNFαやアルブミンに関してはほぼ同等の発現を認めた。作成したiPS由来肝細胞を免疫抑制ラットに移植し移植後60日目にラット肝を評価した。ヒト特異的アルブミンの免疫染色にて、拒絶を認めず、90％以上の細胞が陽性となり、再分布させることができた。ラットにiPS由来肝細胞を移植した90日目の肝臓をコラゲナーゼ処理することで、肝細胞を単離した。単離した肝細胞は、同様にヒト特異的アルブミンの免疫染色にて90％以上陽性細胞であり、STEM121(ヒト特異的マーカー)も同様に陽性となった。回収できた細胞は、500x106であり、移植した細胞の500倍の細胞を回収することができた。

The only cure for liver insufficiency is that the doctor of liver transplantation refuses to solve the problem after liver transplantation. In our country, when living donor liver transplantation is performed, the survival rate is high and low after orthotopic liver transplantation. The patient had iPS liver cell (iPS-Heps) formation, liver transplantation (OLT) test, liver transplantation (OLT) test, and overcoming the possibility of overcoming the risk of low risk of liver transplantation. The patients with liver insufficiency were rescued, large quantities of liver cells were rescued, necessary cells were cultured, iPS-Heps cells were cultured in large quantities, and patients with liver insufficiency were cultured in large quantities. IPS cells differentiate, star cells (iPS-Stellates) are co-cultured, iPS-Heps cells differentiate and colonize. This time, the purpose, the iPS-Stellates, the co-culture, the iPS-Heps differentiation, the colonization, the culture, the mass culture and the methods of iPS-Heps were established. The results of this study were reported in this year's report. The differentiation of iPS cells and liver cells was not clear. The cause of iPS is higher in normal liver cells than in normal liver cells than in HNF α cells. After 60 days of iPS transplantation, immunosuppression, immunosuppression and liver transplantation were performed. Specific antibodies were detected by immunostaining, rejected by immunostaining, more than 90% by immunostaining, and redistributed by immunostaining. This is the cause of iPS liver transplantation. 90 days after transplantation, the liver cells are separated from each other. The immune staining of isolated liver cells, specific immune staining and STEM121 (specific immune staining) is the same as that of normal liver cells. Go back to the cell, 500x106 the cell, and transplant the cell by 500x.