凝固と抗凝固の不均衡が及ぼすトロンビン生成とフィブリン構造、機能-病的血栓の解明

凝血与抗凝失衡引起的凝血酶生成、纤维蛋白结构和功能 - 阐明病理性血栓

• 批准号: 22K09055
• 负责人: 市川 順子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09055/
• 关键词: 新鮮凍結血漿; クリオプレシピテート; 凝固因子; 抗凝固因子; 血栓形成; トロンビン生成; 炎症

本研究の目的は、病的血栓形成の機序を解明することにあり、術後血栓のひとつの要因として、周術期に用いる血液製剤投与がある。日本において凝固因子補充目的で用いられる血液製剤は新鮮凍結血漿（FFP）とクリオプレシピテート（Cryo）がある。CryoはFFPよりも高濃度のフィブリノゲンを含み止血改善効果が高いが、その作成に大型の冷却遠心機が必要になる。そこで、人工心肺中にFFPを投与し限外濾過により濃縮した場合を想定し、in vitroで透析膜を用いてFFPを限外濾過（UF）後に生成した濃縮物を凝固因子活性などにつきCryo製剤と比較検討した。37℃で融解したFFPを500mlの生理食塩水で洗浄後の透析膜内に流入させ、ポンプによって流量300ml/minで送液を行い、検体量を含めて廃液360mlを排出させ濃縮させた。FFPとUF後の濃縮物及びCryoの各種蛋白、各凝固因子、抗凝固因子、血液凝固機能などを測定し、各因子を比較検討した。UF濃縮液はCryoと比較して、フィブリノゲン濃度、FⅧ活性、vWF活性、浸透圧は有意に低いものの、FⅤ、ＦⅨ活性、アンチトロンビン濃度、総蛋白、アルブミン、比重が有意に高かった。ROTEMではCryoの最大血餅硬度がUF濃縮液と比較して有意に高く、フィブリノゲン濃度上昇を反映していると考えた。本研究における透析膜の分画分子量10kDa程度であり、理論上、分子量10~50KDa程度以上の成分を濃縮回収できる。しかし、UFにおけるフィブリノゲンの回収率は34.8％と低く、これは全濾過による目詰まりや濃度分極が進行した結果、膜の分離性能の低下が原因と考えた。一方、蛋白やアルブミン濃度は高く膠質浸透圧維持に有効であり、アンチトロンビン活性も高いゆえ抗血栓性にも優れていると考えた。

The purpose of this study was to clarify the mechanism of thrombosis, the main causes of postoperative thrombosis, and the use of blood control agents during surgery. The purpose of coagulation factor supplementation in Japan is to prepare fresh frozen plasma (FFP) for use in blood preparation. Cryo has high concentrations of FFP and high hemostatic effects. It is necessary to make large cooling remotes. In addition, the artificial heart and lung FFP injection and limited external filtration (UF) after the concentration of the situation to determine, in vitro dialysis membrane FFP after limited external filtration (UF) to produce concentrate coagulation factor activity to determine the preparation of Cryo FFP 500ml of physiological water after melting at 37℃, flow rate 300ml/min, liquid feeding, liquid volume 360ml, concentration Various proteins, coagulation factors, anti-coagulation factors, and blood coagulation functions of the concentrates after FFP and UF and Cryo were measured, and each factor was compared and discussed. UF concentrate is intentionally low in Cryo concentration, F VIII activity, vWF activity, penetration pressure, F V, F IX activity, Cryo concentration, total protein, Cryo concentration and specific gravity. ROTEM is a reflection of Cryo's maximum blood cake hardness and UF concentrate concentration. In this study, the molecular weight of the dialysis membrane is about 10kDa, and theoretically, the molecular weight of the components above 10~50 kDa is concentrated. The recovery rate of UF membrane was 34.8%. The separation rate of UF membrane was 34.8%. The separation rate of UF membrane was 34.8%. One side, the protein concentration is high, the colloid penetration pressure is maintained, the activity is high, and the antithrombotic property is excellent.