急性呼吸促迫症候群に対する造血幹細胞移植：炎症制御と血管再生の試み

造血干细胞移植治疗急性呼吸窘迫综合征：炎症控制和血管再生的尝试

• 批准号: 22K09131
• 负责人: 加納 秀記
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09131/
• 关键词: MPO-DNA; cf-DNA; ARDS; 急性呼吸促迫症候群; 炎症制御

ARDSの発症機序として、neutrophil extracellular traps (NETs)由来のDNAに結合したprotease、histone、血小板血栓などが細胞障害を惹起していると考えられる。ARDSに対する治療戦略として、これら攻撃因子に対する炎症制御が、主に検討され治療応用されている。しかしながら、防御因子を高める治療戦略である、再生・修復促進に関しては、検討が行われていない。骨髄幹細胞は、組織低酸素、組織障害時にサイトカイン等の刺激で骨髄から障害組織に急速にホーミングされ集積する。障害部位にホーミングした幹細胞は、抗アポトーシス、抗酸化ストレス、抗炎症作用を発揮し、障害細胞の再生・修復機能を担っている。本研究は、骨髄からの前駆細胞の動員、前駆細胞動員に関与する液性因子濃度と肺酸素化との関連をヒトのARDSで検討する。対象は、敗血症性ARDSの成人で、診断後1、3、5、7、14日目に各々4mlずつ採血し、末梢血中幹細胞数、VEGF、GM-CSF、CXCL12、soluble Tie2受容体, angiopoietin 1-2, VEGF受容体1-2、PDGF、血中遊離トロンボモジュリン、syndecan-1、好中球CD64発現量、MPO-DNA, NE-DNA, 内皮細胞由来microparticle (EMP)、炎症反応を測定する。BALFにおいては好中球数、好中球エラスターゼ-DNA、MPO-DNA, 好中球CD64発現を測定する。現在、NETs産生量の指標になりうる血液中のMPO-DNA, NE-DNA, cell-free (cf)-DNAの測定系を確立するための基礎実験を開始している。cf-DNAは、Qubit３蛍光光度計を用いて順次測定を行っている。MPO-DNA, NE-DNAは、96穴マイクロプレートに、抗MPOおよび抗NEモノクローナル抗体を固着させたのちマイクロプレートリーダーで測定するサンドイッチELISA法を用いて測定する予定にしている。

The pathogenesis of ARDS is due to DNA binding, protease, histone, platelet thrombosis, and cellular damage. ARDS treatment strategy, attack factors, inflammation control, main treatment strategy The defense factor is high, the treatment strategy is high, the regeneration is high, the repair promotion is high, and the treatment is high. Bone marrow stem cells are stimulated by tissue hypoxia and tissue damage, resulting in rapid accumulation of tissue damage. Stem cells in the damaged parts are responsible for the development of anti-inflammatory, anti-acidification and anti-inflammatory functions, and the regeneration and repair functions of damaged cells. This study investigated the relationship between cytokine concentrations and pulmonary acidosis in ARDS and bone marrow progenitor cell mobilization. 4ml of blood samples were collected from adults with ARDS, 1, 3, 5, 7 and 14 days after diagnosis, and the number of stem cells in peripheral blood, VEGF, GM-CSF, CXCL1 - 2, soluble Tie2 receptor, angiopoietin 1 - 2, VEGF receptor 1 - 2, PDGF, free protein in blood, syndecan-1, CD64 production, MPO-DNA, NE-DNA, endothelial cell origin microarticle (EMP) and inflammatory response were measured. BALF can be used to determine the number of good spheres, the number of good spheres, MPO-DNA, and the number of good spheres CD64. Now, the baseline for determining MPO-DNA, NE-DNA, cell-free (cf)-DNA in blood is being established. cf-DNA and Qubit3 spectrophotometer were used for sequential determination. MPO-DNA, NE-DNA, 96-hole anti-MPO and anti-NE anti-MPO antibodies were immobilized and determined by ELISA.