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くも膜下出血に対する大脳オルガノイドの経動脈的投与による再生法の開発

经动脉给予脑类器官治疗蛛网膜下腔出血再生方法的开发

基本信息

批准号：
22K09257
负责人：
寺田栄作
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09257/
关键词：
大脳オルガノイド頸動脈投与くも膜下出血経動脈投与

项目摘要

びまん性脳損傷をきたすくも膜下出血の治療は動脈瘤の再破裂予防や急性期の血管攣縮予防、全身状態管理などしか出来ることはなく、慢性期においてもリハビリテーションを行い、残存する脳機能を活性化する方法しかないのが現状である。本研究においては大脳オルガノイド並びに内側神経節隆起オルガノイドを用いて作成した未分化な微小スフェロイドを頸動脈的に投与することで大脳全体へと移植細胞を運搬し生着させることで脳機能を回復させることを目指している。本年度はiPS細胞（201B7株・409B2株）から大脳オルガノイドの安定的に作成することから開始した。大脳オルガノイドの作成方法は確立できたため、微小スフェロイドの作成方法の実験を開始した。まずは細胞剥離用酵素（Accutase）を用いて70日間培養した大脳オルガノイドを単細胞にまで分離し、その単細胞自体を接着培養することで生着できるのかを確認したところ、生着が確認でき、神経細胞に分化していることが確認できた、続けて、単離した細胞を96 well plateを用いて再凝集を行ったところ微小な細胞塊を形成した。大きさとしては1400マイクロメートルほどであり頸動脈的な投与を行うには大きくて不適と考えられたためさらなる大きさの調整は必要と考えられた。微小スフェロイドの免疫染色をすると神経への分化は確認できた。今後は凝集させる細胞数の調整を行い、頸動脈投与に適した大きさのスフェロイドの作成を行わないといけないと考えられる。

Treatment of sexual aneurysm injury, submembranous hemorrhage, prevention of rerupture of aneurysm, prevention of vascular contracture in the acute phase, management of systemic condition, prevention of re-rupture of aneurysmることはなく、chronic phase においてもリハビリテーションを行い, the remaining function and activation method are the current situation. In this study, the medial ridge of the medial nerve joints of the large and medium-sized nerves was determinedオルガノイドを Made with いてしたundifferentiated な小スフェロイドをThe injection of the carotid artery is responsible for the overall transport and transport of the transplanted cells and the recovery of the functions of the transplanted cells. This year, the stable production of iPS cells (201B7 strain and 409B2 strain) has begun. The preparation method of large オオルガノイドの is established and the preparation method of small スフェロイドの is started.まずはEnzyme for cell exfoliation (Accutase)をUsing いて70 day cultureした大脳オルガノイドを単cellsにまでisolationし、その単cell autologous culture生することで生できるのかをconfirmationしたところ,生がconfirmationでき,神Differentiation of cells, confirmation of cell differentiation, separation of cells, 96 The well plate is formed by re-agglutination of tiny cells into small pieces.大きさとしては 1400マイクロメートルほどでありCarotid artery no investment and を行うには大きくてImportant and necessary adjustment is necessary Microscopic immunostaining is used to confirm the differentiation of microorganisms. In the future, it will be necessary to adjust the number of cells for agglutination and carotid artery administration.きさのスフェロイドの成を行わないといけないと卡えられる.