Peptide LvによるOA疼痛制御機構の解明と疼痛治療シーズの創出

阐明 Lv 肽控制 OA 疼痛的机制并创建疼痛治疗种子

• 批准号: 22K09315
• 负责人: 相川 淳
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Kitasato University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09315/
• 关键词: Peptide Lv; 変形性関節症; 変形性膝関節症

変形性関節症の病態において種々の神経ペプチドが関与することが報告されている。近年、我々は神経ペプチドPeptpide Lv 欠失マウスは滑膜炎モデルにおけるTNF-a発現が亢進することを明らかにした。しかし、Peptide Lv発現細胞やPeptide Lvの機能は十分に明らかになっていない。本研究ではヒト滑膜組織におけるPeptide Lv産生細胞とマクロファージの極性化に対するPeptide Lv作用を検討した。人工膝関節全置換術施行時に変形性膝関節症患者から滑膜組織を採取した。酵素処理後、抗CD90(線維芽細胞)、CD31(血管内皮細胞)、CD45（白血球共通抗原）抗体を用いて各細胞分画を採取した。各分画におけるPeptide Lvの発現をreal time PCRを用いて検討した。骨髄マクロファージをPeptide Lv 存在下、非存在下でリポポリサッカライド (LPS)による刺激を行った。刺激後、M1 marker (iNOS, IL-12, TNF-a) の発現をリアルタイムPCRおよびELISAを用いて検討した。CD45-CD31-CD90+陽性細胞におけるPeptide Lvの発現は他の分画に比べて有意に高かった。iNOS、IL-12およびTNF-aのmRNA発現及びタンパク濃度はLPS刺激によって増加し、Peptide Lv 存在下で抑制された。近年、マクロファージと線維芽細胞のインターラクションによる炎症制御が報告されている。本研究結果から、滑膜線維芽細胞はPeptide Lvを介してマクロファージのM1 polarizationを抑制している可能性が示唆された。本機構は関節内の炎症制御に重要な役割を果たしているかもしれない。

The pathological changes in arthrosis are reported in the brain. In recent years, we have been working on the development of TNF-A in synovitis. Peptide Lv is a very important component of Peptide Lv. This study investigated the role of Peptide Lv in the polarization of synovial tissue. Synovial tissue was collected from patients with knee arthrosis during total knee arthroplasty. After enzyme treatment, anti-CD90 (vascular germ cells), CD31 (vascular endothelial cells), CD45 (leukocyte common antigen) antibodies were used to separate the cells. Peptide LV is detected in each segment using real time PCR. The stimulation of "Bone Macrongue" is carried out in the presence and absence of Peptide Lv. After stimulation, M1 marker (iNOS, IL-12, TNF-a) was detected by PCR and ELISA. CD45-CD31-CD90 + positive cells showed higher levels of Peptide Lv than other cells. The mRNA expression of iNOS, IL-12 and TNF-a was inhibited by LPS stimulation and increased in the presence of Peptide Lv. In recent years, inflammation control has been reported in the development of vascular cells. The results of this study indicate that the inhibition of M1 polarization in synovial fibroblasts mediated by Peptide Lv is possible. This mechanism is important for controlling inflammation in joints.