新規メカノストレス因子による筋疾患への治療介入およびQOL維持への貢献

使用新型机械应力因子对肌肉疾病的治疗干预和维持生活质量做出贡献

• 批准号: 22K09391
• 负责人: 山崎 悟
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: National Cardiovascular Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09391/
• 关键词: サルコペニア; フレイル; 神経筋接合部; 空胞; 核の中心化; 封入体の形成

マウスAIPIDは膜貫通部位１か所の2型膜タンパク質である。生化学的解析を進める中で、細胞外領域であるC末の欠損変異体を発現させると、ミオシンATPaseであるMYK-461処理をして拍動停止した心筋細胞でもSTAT3のリン酸化がみられ、恒常活性化型の変異体であることを見出した（→C-del）。予備的な検討として、心臓以外に骨格筋組織でAIPIDの発現が特異的にみられること、および骨格筋をさらにみると、神経筋接合部(Neuro-Muscular junction: NMJ)へ特異的な局在を示すことを明らかにしてきた。そこで初年度は、上記のC-del、WT、およびGFP（Mock）をAAVウイルスベクターで発現する系を構築し、それそれを8週齢マウスにおける下肢の前脛骨筋（TA）に、～5 × 109 viral genome/マウスの濃度で、50 uLを局所導入した。その後、８週間経過観察した後、骨格筋組織（TA）を回収を行った。その結果、まず、明らかな異常は見られなかった。続いて、回収した組織よりタンパク質を抽出し、Western blot法により、それぞれのAAV導入個体における導入遺伝子の発現評価を行った。その結果、どの群においても安定に発現していることを確認した。さらに、一部については凍結切片を作製したので、まずAIPIDの免疫染色を行った。その結果、NMJの筋肉側のマーカーであるαブンガロトキシンと共局在することが示された。続いて、ヘマトキシリン・エオジン染色により組織の形態を評価すると、WTとC-delにおうて“空胞”が見られた。そこで、Gomoriトリクローム染色を行うと先ほどの空胞部分は、赤紫で染色された構造体が観察される結果となった。

The type 2 membrane that penetrates the MAS AIPID membrane is a type 1 membrane. Biochemical analysis is carried out, and the extracellular domain is processed by ATPase MYK-461.をしてbeating stop でもSTAT3 のリン acidification がみられ, constant activation type の変 allogeneic であることを见出した (→C-del). The prepared な検褜として, the special にみられる of the bone lattice tissue other than the heart and the AIPID の発appear Neuro-Muscular junction: NMJ) is a special junction in the すことを明らかにしてきた.そこで年は、上记のC-del、WT、およびGFP（Mock）をAAVウイルスベクターで発appearsするsystemをconstructし、それそれを8week齢マウスにおける Lower limb のanterior tibial tendon (TA)に、～5 × 109 viral genome/マウスのconcentration, 50 uL introduced by the Bureau. After the surgery, after 8 weeks of observation, the bone tissue (TA) was recovered and processed.そのRESULT, まず, 明らかな abnormal は见られなかった.続いて、recycling organization よりタンパク性を出し、Western Blot method: により, それぞれのAAV introduction into individual における introduction of left 伝子の発 now comment価を行った.そのRESULTS, どの群においても stabilization に発appears していることをconfirmation した.さらに, 一についてはfrozen section productionしたので,まずAIPIDのimmunostainingを行った.そのRESULTS, NMJの Muscle side のマーカーであるαブンガロトキシンと同场 is in することが Show された.続いて, ヘマトキシリン・エオジン staining により tissue のmorphology evaluation 価すると, WTとC-delにおうて "empty cells" が见られた.そこで, Gomori トリクローム色を行うと前ほどのempty cell part は, red purple でdye されたconstruct が看される results となった.

项目成果

Identifying antibiotics based on structural differences in the conserved allostery from mitochondrial heme-copper oxidases.

• DOI: 10.1038/s41467-022-34771-y
• 发表时间: 2022-12-08
• 期刊: NATURE COMMUNICATIONS
• 影响因子: 16.6
• 作者: Nishida, Yuya;Yanagisawa, Sachiko;Morita, Rikuri;Shigematsu, Hideki;Shinzawa-Itoh, Kyoko;Yuki, Hitomi;Ogasawara, Satoshi;Shimuta, Ken;Iwamoto, Takashi;Nakabayashi, Chisa;Matsumura, Waka;Kato, Hisakazu;Gopalasingam, Chai;Nagao, Takemasa;Qaqorh, Tasneem;Takahashi, Yusuke;Yamazaki, Satoru;Kamiya, Katsumasa;Harada, Ryuhei;Mizuno, Nobuhiro;Takahashi, Hideyuki;Akeda, Yukihiro;Ohnishi, Makoto;Ishii, Yoshikazu;Kumasaka, Takashi;Murata, Takeshi;Muramoto, Kazumasa;Tosha, Takehiko;Shiro, Yoshitsugu;Honma, Teruki;Shigeta, Yasuteru;Kubo, Minoru;Takashima, Seiji;Shintani, Yasunori
• 通讯作者: Shintani, Yasunori