エクソソーム解析による治療抵抗性腎癌の新規治療戦略と治療効果予測マーカーの開発

利用外泌体分析开发难治性肾癌的新治疗策略和治疗效果预测标记物

• 批准号: 22K09507
• 负责人: 鑪野 秀一
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kagoshima University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09507/
• 关键词: エクソソーム; 腎細胞癌; microRNA-1; MYO15A; 腎癌

今年度は、エクソソームmiR-1の機能と、エクソソームがRCCにおける腫瘍メーカーを構成する可能性について検討した。まず、スピンカラムを用いた方法により、細胞溶解液とヒト血清からエクソソームを回収する方法を確立した。次に、Nanosightのナノ粒子追跡解析とエクソソームマーカーCD63を用いたウェスタンブロット解析により、エクソソームを評価した。その結果、PKH26で標識したエクソソームがレシピエント細胞と融合することを確認した。さらに、miR-1を導入した細胞由来のエクソソームで処理したRCC細胞では、miR-1の発現が上昇した。機能解析の結果、エクソソームmiR-1はコントロールと比較して、細胞の増殖、移動、浸潤を有意に抑制することが示された。また、RCCに関するTCGAデータベースを用いた解析では、臨床RCCサンプルでは正常腎臓サンプルと比較してmiR-1発現が有意に低下しており、miR-1発現が低い患者は高い患者と比較して全生存期間が短いことが示された。さらにRNAシーケンス解析により、エクソソームmiR-1への曝露により、いくつかの遺伝子の発現レベルが変化することが示された。TCGAデータベースを用いた解析では、RCCにおいてMYO15Aの高発現群ではより悪い転帰と関連することが示された。また臨床患者の血清から採取したエクソソームのRT-qPCR解析により、MYO15Aは健常対照と比較してRCC患者で有意に発現が上昇することが示された。この研究により、エクソソームmiR-1による治療がRCCの治療に有効なアプローチとなる可能性が示された。また、エクソソームMYO15AはRCCの診断用腫瘍マーカーとなる可能性も示唆された。

This year, the function of miR-1 and the possibility of RCC formation are discussed. The method of cell lysis and serum recovery was established. Second, Nanosight's particle tracking analysis and evaluation of CD63 The results of PKH 26 identification were confirmed. When miR-1 was introduced into RCC cells, the expression of miR-1 increased. The results of functional analysis show that miR-1 can be inhibited intentionally by cell proliferation, migration and infiltration. TCGA profile analysis for RCC is performed in patients with low miR-1 profile compared with normal RCC profile and in patients with high miR-1 profile compared with normal RCC profile. The RNA system is analyzed, and the miR-1 gene is detected. TCGA's high-level analysis of the problem shows that Serum samples from clinical patients were analyzed by RT-qPCR and MYO15A was found to be significantly higher in RCC patients than in controls. This study shows the possibility of treating RCC with miRs-1. MYO 15 A is a diagnostic tool for RCC.