Elucidation of renal spontaneous immune tolerance focusing on plasmacytoid dendritic cells - therapeutic strategies for induction of human renal immune tolerance

以浆细胞样树突状细胞为中心阐明肾自发免疫耐受——诱导人肾免疫耐受的治疗策略

• 批准号: 22K09514
• 负责人: 篠田 和伸
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: St. Marianna University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09514/
• 关键词: 免疫寛容; 制御性形質細胞様樹状細胞; siglec-H; 腎移植; 腎自発免疫寛容; 形質細胞様樹状細胞; Siglec-H; 制御性T細胞

本研究は、マウス腎移植モデルにおいて、免疫抑制剤無しでアロ抗原に対する免疫寛容が成立する「腎自発免疫寛容」のメカニズムを解明することを目的としている。先行研究で、制御性形質細胞様樹状細胞（制御性pDC）がアロ腎移植モデルにおいて腎自発免疫寛容成立のために重要であることが示唆されたが、特にそのマーカーの一つであるsiglec-Hに着目し研究計画を立案した。本年度はpDC特異的にジフテキアトキシンレセプター（DTR）を組み込んだ遺伝子改変マウス（Siglech-DTR）を繁殖する予定でいた。このマウスにジフテリアトキシンを投与することでpDC(Siglec-H陽性細胞)を特異的に消去することが可能であり、腎自発免疫寛容のメカニズムにおけるpDCの役割をより詳細に評価することができる。本年度は繁殖室の調整に時間がかかり、Siglech-DTRマウスを実験有効数まで繁殖させるまでには至らなかった。実験進捗状況としては、マウス腎移植モデルをIsogfraftを用いて多数の腎移植を行い、一定の確率での成功率が得られた。次年度、siglech-DTRの繁殖が順調にすすめばすぐにでも実験にとりかかれる準備は整っている。また、免疫応答評価のため混合リンパ球試験（MLR）を行う予定でいるが、これに関してはResponder細胞をCFSE染色して、4-6日目の免疫応答後の分裂細胞割合をFlowcytometryで評価を行った。Stimulatorとしてビーズ（CD3, CD28）とアロ細胞を用いて比較を行ったが、MLRにより同等の細胞分裂反応を検出することができ、in vitroのCFSE-MLRの系はほぼ確立できたと考えている。

In this study, transplantation and immunosuppression were performed. Antigens were tested. Immune capacity was established. Autoimmune capacity was established. In the first place, we should make a study of the shape of the cell (pDC), transplant the immune system, establish the immune capacity, show the importance of the immune system, and make sure that the research plan is based on the goal of the siglec-H. In this year's pDC special program, the number of children (DTR) has been changed to improve the number of children (Siglech-DTR) who are expected to reproduce. The elimination and autoimmunity of the pDC (Siglec-H sex cell) special device is not possible, and the autoimmune capacity is different from that of the pDC cutout. In the breeding room this year, there are several cycles in the breeding room during the whole period of time, and there are several times for breeding in the breeding room this year. There are several cycles in the breeding room for the whole time of the breeding room, and there are several cycles in the Siglech-DTR breeding room. In order to ensure the success rate of transplantation, the majority of Isogfraft transplants are required to ensure that the success rate is high. In the next year, siglech-DTR will breed and prepare to make full use of it. The cells were stained by CFSE staining for Responder cells. After immunization for 4-6 days, the cleavage cells were cleaved into Flowcytometry cells after immunization. The cells of the Stimulator family (CD3, CD28) are divided into three groups: the cell line, the MLR cell, the cell division unit, the CFSE-MLR cell line, the cell cycle, the cell cycle.