Elucidation of renal spontaneous immune tolerance focusing on plasmacytoid dendritic cells - therapeutic strategies for induction of human renal immune tolerance

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本研究は、マウス腎移植モデルにおいて、免疫抑制剤無しでアロ抗原に対する免疫寛容が成立する「腎自発免疫寛容」のメカニズムを解明することを目的としている。先行研究で、制御性形質細胞様樹状細胞（制御性pDC）がアロ腎移植モデルにおいて腎自発免疫寛容成立のために重要であることが示唆されたが、特にそのマーカーの一つであるsiglec-Hに着目し研究計画を立案した。本年度はpDC特異的にジフテキアトキシンレセプター（DTR）を組み込んだ遺伝子改変マウス（Siglech-DTR）を繁殖する予定でいた。このマウスにジフテリアトキシンを投与することでpDC(Siglec-H陽性細胞)を特異的に消去することが可能であり、腎自発免疫寛容のメカニズムにおけるpDCの役割をより詳細に評価することができる。本年度は繁殖室の調整に時間がかかり、Siglech-DTRマウスを実験有効数まで繁殖させるまでには至らなかった。実験進捗状況としては、マウス腎移植モデルをIsogfraftを用いて多数の腎移植を行い、一定の確率での成功率が得られた。次年度、siglech-DTRの繁殖が順調にすすめばすぐにでも実験にとりかかれる準備は整っている。また、免疫応答評価のため混合リンパ球試験（MLR）を行う予定でいるが、これに関してはResponder細胞をCFSE染色して、4-6日目の免疫応答後の分裂細胞割合をFlowcytometryで評価を行った。Stimulatorとしてビーズ（CD3, CD28）とアロ細胞を用いて比較を行ったが、MLRにより同等の細胞分裂反応を検出することができ、in vitroのCFSE-MLRの系はほぼ確立できたと考えている。