Regeneration of functional bladder using two-layered bioabsorbable scaffolds with amniotic supernatant and adipose derived stem cells

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膀胱組織再生に最適な足場材料を作製するために、P(LA/CL)の重合比率及びエレクトロスピニングの条件設定等をまず検討した。重合比はPLA=100%、LA:CL=80:20、70:30、50:50、PCL=100%の5種類を使用した。エレクトロスピニング条件はトラバース速度100～250mm/min、回転速度100～150rpm、シリンジ速度0.05～0.1mm/min、電圧5～10kVの範囲で設定した。溶媒には1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロプロパノールを使用した。濃度は10～15%の範囲で調製し使用した。結果、重合比がPLA=100%やPLC=100%では、材料そのものの伸縮性が非常に低く、LA:CL=70:30が最も伸縮性の高い材料となった。また、P(LA/CL)とエタノールとを同時に噴射することによって、より繊維間隔の広い材料を作製することに成功した。そこで、次に最適なLA:CL=70:30の材料を使用し、ラットの皮下ポケットに埋植し、組織形成について評価を行った。その結果、3週間後には繊維内部にまで細胞浸潤が認められ、血管の形成を複数確認することができた。さらに、P(LA/CL)70/30の材料を使用して、溶液を凍結乾燥し、スポンジを作製することに成功した。このスポンジ材料でラットの皮下埋植を行ったところ、3週間で繊維内部まで細胞浸潤と血管形成が認められていた。膀胱組織への使用はスポンジ状が厚みもあり、血管の形成が豊富であるため最適であることが考えられた。