卵巣明細胞癌に対するPARP阻害剤と血管新生阻害剤の併用効果

PARP抑制剂与血管生成抑制剂联合治疗卵巢透明细胞癌的效果

• 批准号: 22K09557
• 负责人: 飯田 泰志
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09557/
• 关键词: 卵巣癌; 明細胞癌; 血管新生阻害剤; PARP阻害剤

卵巣明細胞癌細胞株であるOVISE細胞に対してPARP阻害剤と血管新生阻害剤を併用するとPARP阻害剤の感受性が高まることを示した。血管新生阻害剤を投与すると相同組み換え修復の活性が低下することをAssay for Site-specific Homologous Recombination Activity (ASHRA)を用いて示した。OVISE細胞に対してDNA損傷（放射線照射）を加えた後に血管新生阻害剤のBevacizumabを投与した場合に発現量の変化する遺伝子をRNAシークエンスで検証した。これにより相同組み換え修復に関与する遺伝子であるCRY1の発現が有意に低下することを確認した。siRNAを用いてCRY1の発現を抑制することにより相同組み換え修復活性が低下し、さらにBevacizumabにより抑制されたCRY1の発現を遺伝子導入により回復させると相同組み換え活性も回復することをASHRAを用いて示した。CRY1はPhosphoinositide 3-kinase (PI3K)/AKT経路の下流遺伝子と報告されている。Bevacizumabの投与によりPI3K/AKT経路の活性化の指標となるp-AKTの発現は抑制され、またsiRNAを用いたVEGFR2の抑制およびLY294002を用いたPI3K/AKT経路の抑制により、CRY1の発現が抑制されることを確認した。これらの結果からBevacizumabがVascular Endothelial Growth Factor (VEGF)/ VEGF receptor (VEGFR)/PI3K経路を介してCRY1の発現を抑制していることを示した。CRY1阻害剤のKS-15によりPARP阻害剤の感受性が高まることを示し、in vitroの実験においてBevacizumabはVEGF/VEGFR/PI3K経路を介してCRY1の発現を抑制し、PARP阻害剤の感受性を高めているという結論に達した。

这项研究表明，PARP抑制剂和血管生成抑制剂的组合提高了PARP抑制剂对卵形细胞（一种透明细胞癌细胞系）的敏感性。血管生成抑制剂的施用使用特定于特定地点的同源重组活性（ASHRA）的测定方法降低了同源重组修复的活性。通过RNA测序验证了当DNA损伤（辐照）应用于卵形细胞，然后给予血管生成抑制剂贝伐单抗的基因，然后通过RNA测序验证。这证实了CRY1的表达是参与同源重组修复的基因，显着降低了。使用ASHRA，表明使用siRNA抑制CRY1表达会减少同源重组修复活性，并且当通过基因转移恢复贝伐单抗抑制的CRY1表达时，同源重组活性也会恢复。据报道，CRY1是磷酸肌醇3-激酶（PI3K）/AKT途径的下游基因。我们证实，贝伐单抗的给药抑制了P-AKT的表达，P-AKT的表达是PI3K/AKT途径激活的指标，并使用LY294002使用siRNA和PI3K/AKT途径抑制VEGFR2抑制了CRY1的表达。这些结果表明，贝伐单抗通过血管内皮生长因子（VEGF）/VEGF受体（VEGFR）/PI3K途径抑制CRY1表达。我们表明，CRY1抑制剂KS-15增加了PARP抑制剂的敏感性，并且在体外实验中，我们得出的结论是，贝伐单抗通过VEGF/VEGFFR/PI3K途径抑制CRY1的表达，并提高了PARP抑制剂的敏感性。