eEF1a2をtargetにした卵巣明細胞癌に対する新規治療法の開発

开发针对 eEF1a2 的卵巢透明细胞癌新疗法

基本信息

批准号：
22K09600
负责人：
三宅龍太
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Nara Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09600/
关键词：
卵巣がん明細胞癌 eEF1A2

项目摘要

eEF1A2を高発現する卵巣明細胞癌細胞株に対して、新規抗悪性腫瘍薬であるPlitidepsinの腫瘍増殖抑制効果やApoptosis誘導をin vitro実験系で確認している。卵巣明細胞癌の細胞株であるKOC-7C, RMG-1, TOV-21Gという3つの細胞株を用い、Plitidepsinを0nM, 0.5nM, 1nM, 5nM, 10nM, 50nM, 100nMと濃度勾配をつけて培養液に混合し、48時間培養後にMTSを加えて吸光度測定を行った。すると、Plitidepsinの濃度依存性にそれぞれの卵巣明細胞癌細胞株の増殖抑制効果がMTS assayで確認された。それらの細胞株において、eEF1a2発現ベクターを用いてeEF1a2を過剰発現した株、そしてsi RNAによりノックダウンした株に対して、Plitidepsinを投与した。上記の方法と同様に、48時間培養後にMTS assayで増殖抑制効果を評価すると、eEF1A2の過剰発現株においてPlitidepsinの効果は強く、ノックダウン株に対して弱くなった。そのため、依然詳細な機序は明らかになっていないが、PlitidepsinはeEF1A2をターゲットとして抗悪性腫瘍効果を持つことが示唆される。また、新たに増殖を抑制する効果のある薬剤の検索として、Lactoferrinの投与について検討した。Lactoferrinは癌細胞の浸潤能や移動能を抑制することが報告されているが、卵巣明細胞癌に対する効果について、既報は乏しい。Lactoferrinを細胞株を培養する培地に加えると、濃度依存性に細胞死を誘導する可能性について示唆された。

体外实验已经证实了肿瘤的生长抑制作用和高度表达EEF1A2的卵巢透明细胞癌细胞系中凋亡的诱导。使用了卵巢透明细胞癌的三种细胞系，即KOC-7C，RMG-1和TOV-21G，并将plitidepsin混合到培养基中，浓度为0nm，0NM，0NM，1NM，1NM，5NM，10NM，10NM，50NM，50NM，50NM和100NM，100NM和100nm，以及在培养后培养48小时，可通过48小时的吸收，加拿大，加入，并添加MT，并添加MT。 MTS测定法证实了每种透明细胞癌细胞系的生长抑制作用，以plitidepsin的浓度依赖性方式。在这些细胞系中，使用EEF1A2表达载体过表达EEF1A2的菌株和被Si RNA击倒的菌株被施用。与上述方法相似，当孵育48小时后通过MTS分析评估生长抑制作用时，在过表达的EEF1A2菌株中，plitidepsin的作用很强，并在敲低菌株上削弱了。因此，尽管详细的机制尚不清楚，但建议plitidepsin具有抗阴性肿瘤作用，靶向EEF1A2。此外，我们研究了乳铁蛋白的给药，以寻找具有抑制生长作用的新药。尽管据报道乳铁蛋白可以抑制癌细胞的侵入性和迁移性，但其对透明卵巢癌的有效性几乎没有报道。将乳铁蛋白添加到培养基中以培养细胞系，表明它可能以浓度依赖性的方式诱导细胞死亡。