細胞性トロフォブラストサブタイプによる、トロフォブラスト融合メカニズムの解明

通过细胞滋养层亚型阐明滋养层融合机制

• 批准号: 22K09608
• 负责人: 田邉 裕美
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Center for Child Health and Development
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09608/
• 关键词: Annexin V; CD49f; ERVFRD-1; CGA; トロフォブラスト; 細胞融合; CTBサブタイプ; 網羅的遺伝子発現解析; 上流解析

妊娠期間を通じ、胎盤関門を構成する合胞体性栄養膜細胞(STB)は、増殖能と多分化能を持つ未分化な細胞性栄養膜細胞(CTB)の分化・細胞融合によって形成維持される。満期娩出胎盤の絨毛から分離した栄養膜細胞(primary human trophoblast、以下PHT)は生体外でも融合能が維持され、細胞融合や胎盤機能を検討するモデルとなる。本研究はこのPHTを用い、CTBの分化・細胞融合の分子スイッチ、及び融合スイッチのon・offの切り替え機構など、分子機序の解明を目的とする。本年度は第一段階として、フローサイトメトリーを用い、様々な分化状態を含むPHTから、分子マーカーを用いて融合スイッチがonになったCTBと、offのCTBの分取を試みた。CTBのマーカーにはCD49fが、融合スイッチのon/offの分子マーカーにはAnnexin Vが適切であった。次に第二段階として、分取したCTBサブタイプ100細胞からライブラリーを作成し、トランスクリプトーム解析を行った。その結果、融合スイッチがonになったCTBでは、ERVFRD-1 (Syncytin2)やCGA、エストロジェン合成に関わる遺伝子の発現が増強していることが判明した。また細胞が融合するためには前段階として細胞が集合する必要がある。そこで融合スイッチがonになったCTBで発現が上昇しているケモカイン関連遺伝子を探索し、ケモカイン受容体Aを見出した。さらに第三段階として、上記トランスクリプトーム解析の発現変動遺伝子をIPAによって上流解析を行い、転写因子や受容体の制御因子の抽出を行った。その結果、成長因子Xが最上位に抽出され、続いて転写因子、受容体などが抽出された。次年度は最上位に抽出された成長因子Xやケモカイン受容体Aを用い、細胞融合が促進されるかなど、培養実験を行って確認してゆく予定である。

During pregnancy, the syncytiotrophic trophic cells (STB) formed by the passage of time and placental closure are formed, and the proliferative and multidifferentiated trophic cells (CTB) are formed and maintained by differentiation and cell fusion. The separation of villi from the placenta after delivery in the first trimester and the maintenance of fusion ability of primary human trophoblast (hereinafter referred to as PHT) in vitro, and the maintenance of cell fusion and placental function are all possible. This study is based on the use of PHT, the molecular structure of CTB differentiation and cell fusion, and the molecular structure of the fusion on and off, and the molecular mechanism of the molecular sequence. This year's first stage of として, フローサイトメトリーを use, 様々なdifferentiation status をcontaining PHTから, Molecule マーカーを Use いて fusion スイッチがonになったCTBと, offのCTBの分take をtrial みた. CTBのマーカーにはCD49fが、Fusionスイッチのon/offのmoleculesマーカーにはAnnexin Vが成であった. The second stage of the second stage is divided into 100 cells of CTBらライブラリーを成し, トランスクリプトームanalytic を行った.そのRESULT, FUSION スイッチがonになったCTBでは, ERVFRD-1 (Syncytin2) やCGA, エストロジェン成に关わる伝子の発 appear が嗗强していることが见明した. The fusion of cells is necessary in the early stage of the fusion of cells.そこでfusionスイッチがonになったCTBで発appearがRISEしているケモカインrelated legacy 伝子をExplorationし, ケモカインReceiver Aを见出した. I PA's upstream analysis and control factors' extraction and control factors.その result, growth factor In the following year, the top player extracted the growth factor The promotion of cell fusion is done, and the culture is confirmed and confirmed.

项目成果

合胞体栄養細胞(STB)の形成において、BMP4は細胞融合を誘導するが、ホルモン分泌など成熟したSTBの形成には他の因子を必要とする

在合体滋养细胞 (STB) 的形成过程中，BMP4 诱导细胞融合，但成熟 STB 的形成还需要其他因素，例如激素分泌。

• 发表时间: 2022
• 作者: 田邉裕美;本村健一郎;折茂圭介;杉山弘樹;栗山幹浩;森田英明;宮戸健二;松本健治
• 通讯作者: 松本健治