Elucidation of the mechanisms underlying drug-resistance and development of predictive biomarker using patient-derived ovarian cancer organoids

使用源自患者的卵巢癌类器官阐明耐药机制并开发预测生物标志物

基本信息

批准号：
22K09631
负责人：
田中尚武
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Chiba Cancer Center (Research Institute)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

患者由来オルガノイド(PDO)は元の腫瘍の特徴を保持しているとされるが、多くのオルガノイド研究において1症例あたり1 PDO樹立が一般的であり、単一のPDOがどの程度腫瘍内の不均一性や多様性を反映しているかについては不明な点が多い。本研究では卵巣がんの多様性と治療抵抗性との関連を明らかにすべく、同一患者から複数のPDO樹立をする。本年度は卵巣がん7例の臨床検体からオルガノイド培養を実施し、5例からPDO 9株を樹立した。そのうち3例については同一症例から複数のPDOを樹立している。5例の組織型の内訳は高異型度漿液性癌1例、癌肉腫2例、明細胞癌1例、類内膜癌1例である。現在樹立したPDOの症例間および同一症例内での多様性について形態学的特徴、遺伝子異常、薬剤感受性など多方面から評価中である。例として、卵巣がんの治療に使用される抗がん剤(パクリタキセル、カルボプラチン、シスプラチン、ドキソルビシン、塩酸イリノテカン（活性代謝物SN-38）、トポテカン、ゲムシタビン)および分子標的薬(オラパリブ、ニラパリブ)に対する感受性を評価したところ、同一腫瘍由来の複数PDO間で明らかに感受性が異なる症例が確認された。このことから、卵巣がんの治療抵抗性を理解する上で、同一患者由来の複数PDOが貴重なリソースとなることが期待される。また、卵巣がんから樹立した単一のPDOがどの程度元の腫瘍の多様性を反映しているかを確認するため、過去にPDOを樹立した高異型度漿液性癌1例の腫瘍内2箇所からサンプリングした凍結組織とPDO 1株から核酸を抽出し、ゲノム解析およびRNAseqによるトランスクリプトーム解析を現在実施中である。

据说患者衍生的类器官（PDOS）保留了原始的肿瘤特征，但是在许多类器官研究中，每病例建立1个PDO是很常见的，尚不清楚单个PDO反映了肿瘤内异质性和多样性的多少。在这项研究中，将从同一患者中建立多个PDO，以阐明卵巢癌的多样性与治疗耐药性之间的关系。今年，从7例卵巢癌病例的临床标本中进行了器官培养物，并在5例中建立了9种PDO菌株。对于其中三种情况，已经从同一情况下建立了多个PDO。组织学类型的五种病例是：1例高触及浆液性癌症，2例癌症病例，1例透明细胞癌和1例子宫内膜类药物癌。目前已建立的PDO病例的多样性和在同一病例中的多样性正在从许多角度进行评估，包括形态特征，遗传异常和药物敏感性。 As an example, when assessing the sensitivity to anticancer drugs (paclitaxel, carboplatin, cisplatin, doxorubicin, irinotecan hydrochloride (active metabolite SN-38), topotecan, gemcitabine) and molecular targeted drugs (olaparib, nilaparib) used to treat ovarian cancer, cases of distinct differences in susceptibility were confirmed在来自同一肿瘤的多个PDO之间。预计这将为了解卵巢癌治疗耐药性提供宝贵的资源。此外，为了确认从卵巢癌中建立的单个PDO反映了原始肿瘤多样性的程度，核酸是从冷冻组织中提取的，并且从先前建立的PDO和基因组分析和RNaseq转录组分析的高性化浆液性癌症肿瘤内的两个位置采样了一种PDO菌株。