Quantitative Proteomic Approaches for Drug Target Discovery in Uterine Carcinosarcoma

①子宮癌肉腫の新規標的蛋白質の同定我々は3種類の子宮癌肉腫(UCS)細胞株とコントロール細胞株である子宮内膜正常細胞(EM-E6/E7/TER細胞)の膜蛋白質を抽出し、iTRAQ法を用いた網羅的膜蛋白質解析を行う予定としていた。しかし、UCS細胞株はいずれも細胞増殖のスピードが非常に遅く、膜蛋白質の網羅的膜蛋白質解析を行うための十分量の蛋白量が回収できないと判断した。そのため、予定していたUCS 3株とコントロール株の膜蛋白質を網羅的に比較検討する実験系は困難と考えられた。UCSは上皮性腫瘍および子宮肉腫の性格を有する腫瘍である。特に子宮肉腫成分の治療に難渋することが多いと考えられ、子宮肉腫の治療標的も並行して探索し、そこでえられた結果をUCSへと応用することとした。②子宮平滑筋肉腫における薬剤耐性因子の探索我々は卵巣癌や子宮内膜癌のプラチナ製剤への耐性に関連する因子としてAnnexin A4 (Anx A4)を同定している。子宮平滑筋肉腫（uLMS）の細胞株であるSK-LMS、SK-UT1、SKNにおいてWestern Blotting 法を用いてAnx A4の発現を解析したところSK-LMS、SKNにおいてAnx A4の発現を認めた。また、uLMSの臨床検体20例において Anx A4の解析を行ったところ12例(66.7%)で発現を認めていた。③ Anx A4の発現の子宮平滑筋肉腫における役割の検討Anx A4を発現するSK-LMS細胞株において、siRNAを用いてAnx A4の発現を抑制したところ、シスプラチンの50%阻害濃度が 16.2μMから5.4μMと低下し有意にプラチナ感受性が改善した(P<0.05)。これらの結果より、uLMSにおいて発現するAnx A4が、プラチナ耐性獲得のメカニズムにおいて重要であることが示唆された。

①子宮癌肉腫の新規標的蛋白質の同定我々は3種類の子宮癌肉腫(UCS)細胞株とコントロール細胞株である子宮内膜正常細胞(EM-E6/E7/TER細胞)の膜蛋白質を抽出し、iTRAQ法を用いた網羅的膜蛋白質解析を行う予定としていた。しかし、UCS細胞株はいずれも細胞増殖のスピードが非常に遅く、膜蛋白質の網羅的膜蛋白質解析を行うための十分量の蛋白量が回収できないと判断した。そのため、予定していたUCS 3株とコントロール株の膜蛋白質を網羅的に比較検討する実験系は困難と考えられた。UCSは上皮性腫瘍および子宮肉腫の性格を有する腫瘍である。特に子宮肉腫成分の治療に難渋することが多いと考えられ、子宮肉腫の治療標的も並行して探索し、そこでえられた結果をUCSへと応用することとした。②子宮平滑筋肉腫における薬剤耐性因子の探索我々は卵巣癌や子宮内膜癌のプラチナ製剤への耐性に関連する因子としてAnnexin A4 (Anx A4)を同定している。子宮平滑筋肉腫（uLMS）の細胞株であるSK-LMS、SK-UT1、SKNにおいてWestern Blotting 法を用いてAnx A4の発現を解析したところSK-LMS、SKNにおいてAnx A4の発現を認めた。また、uLMSの臨床検体20例において Anx A4の解析を行ったところ12例(66.7%)で発現を認めていた。③ Anx A4の発現の子宮平滑筋肉腫における役割の検討Anx A4を発現するSK-LMS細胞株において、siRNAを用いてAnx A4の発現を抑制したところ、シスプラチンの50%阻害濃度が 16.2μMから5.4μMと低下し有意にプラチナ感受性が改善した(P<0.05)。これらの結果より、uLMSにおいて発現するAnx A4が、プラチナ耐性獲得のメカニズムにおいて重要であることが示唆された。