側頭骨扁平上皮癌におけるNLRP3インフラマゾーム機構を介した転移制御機構の解明

近年、腫瘍細胞自体のインフラマゾーム関連分子の発現が、細胞増殖能や浸潤・転移能に関与することが徐々に明らかになってきた。特に、NLRP3インフラマゾームは、多くの癌腫で研究が進んでおり、NLRP3の発現が、腫瘍浸潤能亢進およびリンパ節転移の関与することが大腸癌細胞で明らかになっている。しかし、側頭骨扁平上皮癌におけるインフラマゾームの関与は未だ不明である。本研究では、NLRP3インフラマゾームの活性化が側頭骨扁平上皮癌にもたらす影響を評価し、側頭骨扁平上皮癌のNLRP3インフラマゾームを介した転移制御機構のメカニズムの一端を明らかにするのが本研究の目的である。本年度は、我々が樹立した外耳道扁平上皮癌細胞株（SCEACono2）を用いて、NLRP3の機能解析を行なった。　典型的な頭頸部扁平上皮癌を比較対象とするために、口腔扁平上皮癌細胞株であるSCC9 もしくは HSC4 を用いた。細胞内のNLRP3をノックダウンすると、SCEACono2細胞の増殖は有意に抑制され,スクラッチアッセイでも細胞の遊走能は有意に低下した。一方、SCC9では抑制効果はいずれも限定的であった。しかし、RNAseaの結果から、SCEACono2細胞では有意にNLRP3の発現が低下していたが、SCC９ではNLRP3のノックダウン効率が悪いことがわかり、同実験は、再度検証中である。また、過去の報告では、がん細胞内のNLRP3の発現を抑制すると、上皮間葉転換に関与する遺伝子群の発現が低下するとの報告されている。そのため、NLRP3の発現が、上皮間葉転換を促進することで、細胞の遊走能や浸潤能を亢進しているとの仮設を立て、siRNAでNLRP3をノックダウンした細胞で、E－CadherinとVImentinの発現をウエスタンブロットで確認したが、発現の低下は認めなかった。

近年、腫瘍細胞自体のインフラマゾーム関連分子の発現が、細胞増殖能や浸潤・転移能に関与することが徐々に明らかになってきた。特に、NLRP3インフラマゾームは、多くの癌腫で研究が進んでおり、NLRP3の発現が、腫瘍浸潤能亢進およびリンパ節転移の関与することが大腸癌細胞で明らかになっている。しかし、側頭骨扁平上皮癌におけるインフラマゾームの関与は未だ不明である。本研究では、NLRP3インフラマゾームの活性化が側頭骨扁平上皮癌にもたらす影響を評価し、側頭骨扁平上皮癌のNLRP3インフラマゾームを介した転移制御機構のメカニズムの一端を明らかにするのが本研究の目的である。本年度は、我々が樹立した外耳道扁平上皮癌細胞株（SCEACono2）を用いて、NLRP3の機能解析を行なった。　典型的な頭頸部扁平上皮癌を比較対象とするために、口腔扁平上皮癌細胞株であるSCC9 もしくは HSC4 を用いた。細胞内のNLRP3をノックダウンすると、SCEACono2細胞の増殖は有意に抑制され,スクラッチアッセイでも細胞の遊走能は有意に低下した。一方、SCC9では抑制効果はいずれも限定的であった。しかし、RNAseaの結果から、SCEACono2細胞では有意にNLRP3の発現が低下していたが、SCC９ではNLRP3のノックダウン効率が悪いことがわかり、同実験は、再度検証中である。また、過去の報告では、がん細胞内のNLRP3の発現を抑制すると、上皮間葉転換に関与する遺伝子群の発現が低下するとの報告されている。そのため、NLRP3の発現が、上皮間葉転換を促進することで、細胞の遊走能や浸潤能を亢進しているとの仮設を立て、siRNAでNLRP3をノックダウンした細胞で、E－CadherinとVImentinの発現をウエスタンブロットで確認したが、発現の低下は認めなかった。