網膜神経細胞保護作用を介した新たな網膜色素変性治療の検討

通过视网膜神经细胞保护作用治疗新色素性视网膜炎的研究

• 批准号: 22K09780
• 负责人: 瓶井 資弘
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Aichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09780/
• 关键词: 活性化プロテインC; 網膜色素変性; 細胞保護; 網膜細胞保護; 血行再建

我々は、凝固調節因子である活性化プロテインC（Activated Protein C: APC）が虚血に伴う網膜細胞死を抑制することを基礎実験で証明し、また広範囲に閉塞した網膜血流を再灌流させるという臨床試験の結果を以前に報告した。遺伝性網膜変性疾患である網膜色素変性（Retinitis Pigmentosa: RP）においても、APCの網膜細胞保護作用を示すことができるか、また効果があった場合はそのメカニズムを解明するを研究の目的としている。令和4年度は、RP動物モデルにおいてAPCの硝子体内投与による網膜細胞死の抑制効果につき実験的に検証した。RP動物モデルとして頻用されているrd10マウスを用い、変性発症前の生後12日目にAPCを硝子体内投与した。生後28日目に眼球摘出し、網膜凍結切片を作成、DAPIによる細胞核染色を行い、網膜外顆粒層の細胞数を計測した。APC投与群では、非投与群と比較して、外顆粒層の細胞数減少を抑制することが確認できた。また、APCのもつ細胞保護作用のメカニズムの1つに炎症反応の抑制が挙げられる。RP動物モデルにおいても、炎症反応の抑制効果につき検証した。生後12日目にAPCを硝子体内投与した後、生後18日に眼球摘出し、リアルタイムPCRを用いて炎症性サイトカインであるインターロイキン(IL)-1βの発現を解析した。APC投与群では非投与群と比較して、IL-1βの発現が抑制されることが示唆された。

我们先前已经报道了一项临床试验的结果，即激活的蛋白C（APC）抑制缺血相关的视网膜细胞死亡以及广泛遮挡的视网膜血流的再灌注。该研究的目的是确定APC是否也可以在视网膜色素（RP），一种遗传性视网膜退行性疾病中表现出视网膜细胞保护作用，并且如果有效，则其机制。在2022年，我们通过实验测试了玻璃体内给药APC在RP动物模型中抑制视网膜细胞死亡的作用。使用经常用作RP动物模型的RD10小鼠，在出生前的第12天，在出生前的第12天，在出生前的第12天对APC进行授予。在出生后的第28天，制备了视网膜冷冻切片，并使用DAPI进行细胞核染色，以测量术后颗粒层中细胞的数量。已证实，与非管理组相比，APC管理组抑制了外颗粒层中细胞数量的减少。此外，APC的细胞保护作用的一种机制是抑制炎症反应。在RP动物模型中还检查了抑制炎症反应的效果。玻璃体室内在出生后的第12天对APC进行施用后，在出生后的第18天去除眼球，并使用实时PCR分析了炎性细胞因子白介素（IL）-1β的表达。有人提出，与非管理组相比，在APC管理组中抑制了IL-1β的表达。