Development of a novel host-directed therapy for periodontitis based on the bacteria-environment-host interactions

基于细菌-环境-宿主相互作用开发一种针对牙周炎的新型宿主导向疗法

• 批准号: 22K09987
• 负责人: 齋藤 淳
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Tokyo Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09987/
• 关键词: 歯周病原細菌; 歯周炎; 歯周治療; 宿主

歯周炎はプラークバイオフィルムの歯周病原細菌の感染を主な病因とし、宿主因子や環境因子も複雑に関与する多因子性疾患である。本研究は歯周炎の発症および進展に重要な細菌－環境－宿主因子間の相互作用の視点から、新規予防・治療法を開発することを目指して一連の実験を行った。Porphyromonas gingivalis Hgp44のアミノ酸配列199-316領域から分割して15個の合成ペプチド（Pep1-15）を作製した。今回追加の実験として，Pep13を用いて，T. denticolaとの付着をELISA にて解析した。低濃度（0.25nmol/ml）Pep13とT. denticola の付着は，control（合成ペプチド無添加時）に比較して有意に高かった。現在，Pep1-15を介した細菌間の物理的な結合により，バイオフィルム形成にどのような変化が生じるかを検討するための網羅的な遺伝子解析を実施している。Treponema denticolaの，あるDNA binding protein の遺伝子欠損株において，網羅的な遺伝子発現解析を行った結果，本菌の表層タンパク質をコードする遺伝子の発現量が，野生株と比較し有意に増加した。そのタンパク質の抗体を用いて，ウエスタンブロット解析を行った。画像解析ソフトを用いてタンパク質のバンドの濃度をもとに，タンパク質発現量を評価した。欠損株における表層タンパク質の発現量は，野生株と比較して有意に増加した。これらの結果から，DNA binding protein は本菌の表層タンパク質の発現調節に関与することが示唆された。

牙周炎是一种多因素疾病，其中牙菌膜生物膜的主要致病细菌是牙周致病细菌感染，宿主和环境因素涉及复杂的作用。这项研究进行了一系列实验，目的是从细菌，环境和宿主因素之间相互作用的角度开发新的预防和治疗方法，这对于牙周炎的开始和发展很重要。通过将15种合成肽（PEP1-15）分开，通过将牙龈卟啉单胞菌HGP44的氨基酸序列分为199-316区域。作为另一个实验，使用PEP13用于使用ELISA分析与牙本质的粘附。低浓度（0.25 nmol/ml）Pep13和T.牙杆菌的附着明显高于对照（无需添加合成肽）。目前，正在进行全面的遗传分析，以检查细菌之间通过PEP1-15之间的物理结合如何导致生物膜形成的变化。全面的基因表达分析是在Treponema denticola的DNA结合蛋白的基因缺陷株中进行的，与野生菌株相比，该细菌表面蛋白的基因表达水平显着增加。使用蛋白质的抗体进行蛋白质印迹分析。使用图像分析软件根据蛋白质条带的浓度评估蛋白质表达水平。与野生菌株相比，缺陷应变中表面蛋白的表达水平显着增加。这些结果表明，DNA结合蛋白参与该细菌表面蛋白表达的调节。

项目成果

Investigation of a transcriptional-regulator coding gene potentially involved in dentilisin expression

可能参与牙菌素表达的转录调节编码基因的研究

• 发表时间: 2022
• 作者: Hisanaga R;Kitamura Y;Yamashita K;Ishihara K;Saito A
• 通讯作者: Saito A