天然食品成分による口腔癌幹細胞抑制メカニズムの解析：効果的口腔癌治療を目指して

天然食品成分抑制口腔癌干细胞机制分析：瞄准口腔癌有效治疗

• 批准号: 22K10156
• 负责人: 福田 正勝
• 金额: $ 2.58万
• 依托单位: Meikai University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10156/
• 关键词: 口腔癌; p53; CD44; c-Met; 細胞死; ポリフェノール; ピセアタンノール(PIC); 癌幹細胞

5例の口腔扁平上皮癌患者の生検組織ホルマリン固定パラフィン包埋材料について、HE染色標本にて病理診断した後、CD44、c-Met、NF-kBに対する抗体を用いた免疫組織化学的検索を行い、その発現強度および局在を確認した。その結果、5例全例の腫瘍細胞の細胞膜にCD44およびc-Metタンパク質の陽性反応を、腫瘍細胞の核および細胞質にNF-kBの強陽性反応を認めた。5種のヒト口腔癌細胞株におけるc-Met、CD44、NF-kB遺伝子とタンパク質の発現状況を定量性RT-PCR法とWestern blot法にて確認した。その結果、各細胞株においてc-Met、CD44、NF-kB mRNAの構成的な発現を示した。また、SAS細胞において最も強いc-Met mRNAとタンパク質発現量を示した。CD44 mRNAとタンパク質発現量はSAS細胞とHSC-3細胞において他よりも強かった。5種の口腔癌細胞株におけるCD44およびc-Metタンパク質の発現プロファイルをフローサイトメトリーにて解析したところ、同様の結果を得た。次に、SASとHSC-3細胞におけるCD44、c-Met mRNAの発現をsmall interfere (si) RNAを用いてノックダウンしたところ、両細胞の増殖活性は明らかに抑制され細胞数は減少した。また、いずれのノックダウンにおいてもカスパーゼ-3/7、-9の活性化が起こり、アポトーシスが誘導された。以上の結果から、 p53遺伝子変異株であるSAS細胞およびHSC-3細胞において、癌幹細胞のマーカーであるCD44およびc-Metがその増殖活性に重要な働きを担っていることが示唆された。次に、ポリフェノールのピセアタンノール(PIC)を濃度を変えて24時間作用させた時の細胞状態の変化について解析したところ、いずれの細胞も10マイクロモルのPICにて細胞死が誘導された。

5 の oral squamous cell carcinoma patients の 検 organizes ホ ル マ リ ン fixed パ ラ フ ィ ン embedding material に つ い て specimens, HE staining に て pathological diagnosis し た, CD44, c - Met, NF - kB に す seaborne を る antibody with い た immunohistochemical 検 rope line を い, そ の 発 now strength お よ び bureau in を confirm し た. そ の results, all five patients の の swollen sores cell membranes に CD44 お よ び c - Met タ ン パ ク qualitative の positive anti 応 を, swollen sores cell nuclear お の よ び cytoplasm に NF - kB の strong positive anti 応 を recognize め た. Five の ヒ ト oral cancer cell lines に お け る c - Met, CD44, NF - kB but 伝 と タ ン パ ク qualitative の 発 now situation を quantitative rt-pcr method と Western blot method に て confirm し た. Youdaoplaceholder0 そ results, な occurrence of な of c-Met, CD44, NF-kB mRNA <e:1> in each cell line にお て て を を show を た た た. Youdaoplaceholder0 and SAS cells にお また て て て most likely strong <s:1> c-Met mRNAとタ <e:1> パ the amount of <s:1> plasmid released を indicates た. CD44 mRNAとタ パ パ the amount of plasmid in the tissue is <s:1> SAS cells とHSC-3 cells にお て て he よ qiang った. Five の oral cancer cell lines に お け る CD44 お よ び c - Met タ ン パ ク qualitative の 発 now プ ロ フ ァ イ ル を フ ロ ー サ イ ト メ ト リ ー に て parsing し た と こ ろ, with others in the result of の を た. に, SAS と HSC - 3 cells に お け る CD44, c - Met mRNA の 発 を now small interfere (si) RNA を い て ノ ッ ク ダ ウ ン し た と こ ろ, struck cells activated は の raised colonization Ming ら か に inhibit さ れ cell number は reduce し た. ま た, い ず れ の ノ ッ ク ダ ウ ン に お い て も カ ス パ ー ゼ - 3/7-9 の activeness が up こ り, ア ポ ト ー シ ス が induced さ れ た. の above results か ら, traces of p53 伝 sub - different strains で あ る SAS cells お よ び HSC - 3 cells に お い て, cancer stem cells の マ ー カ ー で あ る CD44 お よ び c - Met が そ の raised colonization activities important な に 働 き を bear っ て い る こ と が in stopping さ れ た. に, ポ リ フ ェ ノ ー ル の ピ セ ア タ ン ノ ー ル (PIC) を concentration を - え て 24 time role さ せ た の cell state の variations change に つ い て parsing し た と こ ろ, い ず れ の cells も 10 マ イ ク ロ モ ル の PIC に て induced cell death が さ れ た.

项目成果

Role of lipid metabolism in the proliferation and invasion of human oral cancer

脂质代谢在人口腔癌增殖和侵袭中的作用

• 发表时间: 2022
• 作者: Masakatsu Fukuda;Hideaki Sakashita
• 通讯作者: Hideaki Sakashita