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天然食品成分による口腔癌幹細胞抑制メカニズムの解析：効果的口腔癌治療を目指して

天然食品成分抑制口腔癌干细胞机制分析：瞄准口腔癌有效治疗

基本信息

批准号：
22K10156
负责人：
福田正勝
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Meikai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10156/
关键词：
口腔癌 p53 CD44 c-Met 細胞死ポリフェノールピセアタンノール(PIC)癌幹細胞

项目摘要

5例の口腔扁平上皮癌患者の生検組織ホルマリン固定パラフィン包埋材料について、HE染色標本にて病理診断した後、CD44、c-Met、NF-kBに対する抗体を用いた免疫組織化学的検索を行い、その発現強度および局在を確認した。その結果、5例全例の腫瘍細胞の細胞膜にCD44およびc-Metタンパク質の陽性反応を、腫瘍細胞の核および細胞質にNF-kBの強陽性反応を認めた。5種のヒト口腔癌細胞株におけるc-Met、CD44、NF-kB遺伝子とタンパク質の発現状況を定量性RT-PCR法とWestern blot法にて確認した。その結果、各細胞株においてc-Met、CD44、NF-kB mRNAの構成的な発現を示した。また、SAS細胞において最も強いc-Met mRNAとタンパク質発現量を示した。CD44 mRNAとタンパク質発現量はSAS細胞とHSC-3細胞において他よりも強かった。5種の口腔癌細胞株におけるCD44およびc-Metタンパク質の発現プロファイルをフローサイトメトリーにて解析したところ、同様の結果を得た。次に、SASとHSC-3細胞におけるCD44、c-Met mRNAの発現をsmall interfere (si) RNAを用いてノックダウンしたところ、両細胞の増殖活性は明らかに抑制され細胞数は減少した。また、いずれのノックダウンにおいてもカスパーゼ-3/7、-9の活性化が起こり、アポトーシスが誘導された。以上の結果から、 p53遺伝子変異株であるSAS細胞およびHSC-3細胞において、癌幹細胞のマーカーであるCD44およびc-Metがその増殖活性に重要な働きを担っていることが示唆された。次に、ポリフェノールのピセアタンノール(PIC)を濃度を変えて24時間作用させた時の細胞状態の変化について解析したところ、いずれの細胞も10マイクロモルのPICにて細胞死が誘導された。

In 5 patients with oral flat epithelial carcinoma, the tissue samples were fixed, the embedding materials were embedded, and the HE staining markers were used for pathological diagnosis. CD44, c-Met and NF-kB antibodies were detected by immunocytochemistry. The results showed that in all 5 cases, the cell membrane, CD44, c-Met, nuclear and NF-kB were confirmed in all cases. 5. The cell lines of oral cancer were confirmed by c-Met, CD44 and NF-kB. The present situation was confirmed by quantitative RT-PCR method and Western blot method. The results of the experiment and the results of c-Met, CD44 and NF-kB mRNA of each cell line showed significant difference. The most important thing is that the most important thing is the SAS cell. The most important thing is that the quantity is shown. CD44 mRNA said he needed to measure the SAS cell, the HSC-3 cell, the cell, and the other cell. 5. Oral cancer cell lines were divided into two groups: oral cancer cell line, CD44 cell line, c-Met cell line, oral cancer cell line, oral cancer cell line, Small interfere (si) RNA was detected in small interfere (HSC-3), SASHSC-3, SASHSC3, SASH Please tell me what to do. Please tell me what to do. As a result of the above results, the results of SAS cell cycle, HSC-3 cell cycle, cancer cell cycle, CD44 cell cycle, c-Met colonization activity and important reproductive activity of p53 gene were significantly higher than those of the control group. In the second half of the day, you need to change the number of hours (PIC) to monitor the 24-hour response time. You need to change the status of the computer to analyze the data, and you need to know that the PIC cell is dead.