低酸素細胞の放射線抵抗性におけるcPLA2の働き
cPLA2在缺氧细胞放射抗性中的作用
基本信息
- 批准号:22K10175
- 负责人:
- 金额:$ 2.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本年度は低酸素適応応答に対するcPLA2の関与について検討した。この実験にはcPLA2WTマウスおよびcPLA2KOマウスの肺から分離したcPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の線維芽細胞を使用した。まず、cPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の線維芽細胞を低酸素状態で培養し、細胞死の違いをFACS解析で検討した。その結果、cPLA2(+/+)では約54%の細胞に細胞死がみられたのに対して、cPLA2(-/-)では約20%の細胞にしか細胞死がみられなかった。このことから、cPLA2が低酸素適応応答に関与している可能性が示唆された。さらに、cPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の線維芽細胞に低酸素刺激を行い、低酸素適応応答に中心的な役割を果たす遺伝子であるHIF-1αの発現をウエスタンブロット法で検討した。その結果、cPLA2(-/-)ではcPLA2(+/+)と比較してHIF-1αの発現が抑制されることが確認された。以上のことから、cPLA2はHIF-1αの発現に何らかの影響を与えており、そのことによってcPLA2が低酸素適応応答に関与しているのではないかということが示唆された。また、低酸素刺激によるDNA損傷応答に対するcPLA2の関与を調べるために、cPLA2(+/+)およびcPLA2(-/-)の線維芽細胞に低酸素刺激を行い、ATMのリン酸化およびH2AXのリン酸化についてウエスタンブロット法で検討した。その結果、低酸素刺激によるATMのリン酸化やH2AXのリン酸化についてはcPLA2(-/-)とcPLA2(+/+)の両方で確認されDNA損傷応答が起こることがわかったが、cPLA2(-/-)とcPLA2(+/+)に発現のタイミングや発現量に差はみられなかった。
This year's review of the relationship between CPLA2 and low levels of vitamin C The cPLA2WT and cPLA 2 KO are used to isolate cPLA2(+/+) and cPLA2(-/-) cells. Cell culture and FACS analysis of low acid content, cPLA2 (+/+), cPLA2 (-/-) and cPLA2 (-/-) line-derived cells. As a result, cPLA2 (+/+) decreased approximately 54% of the cells were dead and cPLA2 (-/-) decreased approximately 20% of the cells were dead. The possibility of low acid content in cPLA-2 was discussed. The expression of HIF-1α and the detection of HIF-1α were studied in the presence of low acid hormone stimulation and low acid hormone response in the central part of the cell line. The results showed that cPLA2 (-/-) was inhibited by cPLA2 (+/+) compared with HIF-1α. The effect of HIF-1α on cPLA 2 is related to the occurrence of HIF-1 α. DNA damage response to low acid stimulation is investigated by low acid stimulation, ATM acidification and H2AX acidification in cPLA2 (+/+) and cPLA2 (-/-) vascular cells. The results showed that the expression of cPLA2 (-/-) and cPLA2 (+/+) in the ATM-induced and H2AX-induced DNA damage response was confirmed by the comparison between cPLA2 (-/-) and cPLA2 (+/+).
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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- 发表时间:2022
- 期刊:
- 影响因子:3.7
- 作者:Takagi Yukinori;Hashimoto Kunio;Sasaki Miho;Eida Sato;Katayama Ikuo;Sumi Misa
- 通讯作者:Sumi Misa
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