歯肉退縮の新規治療を目指した創傷治癒性マクロファージの解析

伤口愈合巨噬细胞分析用于治疗牙龈退缩的新方法

• 批准号: 22K10237
• 负责人: 丸岡 亮
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K10237/
• 关键词: 歯肉退縮; マクロファージ

まず、比較的作製が容易なマウス皮膚創傷モデルを作製した。全身麻酔下に、C57BL6/Jマウス（雄：6-8週齢）の背部を除毛し、生研パンチ（径6mm）を用いて背部両側に皮膚全層欠損を作製した。次に、創の収縮を防止するために、約8mm径のOリングを創部周囲に縫着した。その後、防水保護シールを貼って創部の乾燥を防止した。このようにして作製したマウスモデルにおいて、創の治癒を経時的に肉眼観察した。その後、マウスを安楽死させた後、創があった部分を含む皮膚を切除して回収し、ホルマリン固定、パラフィン包埋を行い、薄切して組織切片を作製した。切片をヘマトキシリン＆エオジンで染色し、創部の両端の距離や、肉芽組織形成の程度、マクロファージを含む炎症細胞浸潤の程度などを評価した。また、投与するマクロファージの調製については、骨髄細胞由来および脾臓細胞由来のものについて比較検討した。また、ヒアルロン酸濃度依存的にM2d様の性質を持つようになることを、リアルタイムPCRでVEGFの発現が上昇し、TNFαの発現が低下すること、貪食能アッセイでの貪食能亢進や、トランスウェルアッセイで血管内皮細胞の遊走能が亢進することなどで再確認した。これを踏まえて、骨髄細胞をM-CSF存在下で１週間培養し、得られた骨髄由来マクロファージを、ヒアルロン酸6.7mg/mLを含む培地を用いてさらに1週間培養したものを、上記モデルの創1か所あたり2.5-5.0×10^5細胞投与した群も設定し、検討を開始した。

It's easier to control skin trauma than to control it. C57BL 6/J (male: 6-8 weeks), hair removal on the back, skin development (diameter 6mm), skin damage on the back side The second part is about 8 mm in diameter and the third part is about 8 mm. After the coating, waterproof protection, prevent the drying of the coating. This is the first time I've ever seen a doctor. The skin was removed, fixed, embedded, and sliced. The staining, the distance between the wound ends, the degree of granulation tissue formation, and the degree of inflammatory cell infiltration were evaluated. A comparative study of the modulation of bone marrow cells and spleen cells In addition, the properties of M2d, which are dependent on the concentration of vitamin A, are maintained. VEGF production increases in the presence of vitamin A, TNFα production decreases in the presence of vitamin A, bulimia, and migration of vascular endothelial cells in the presence of vitamin A. In the presence of M-CSF, bone marrow cells were cultured for 1 week, and the results were obtained by adding 6.7 mg/mL of citric acid to the culture medium. In the presence of M-CSF, bone marrow cells were cultured for 1 week, and the results were 2.5-5.0×10^5 cells.