权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

家族性拡張型心筋症の治療に資するナノファイバーを用いたゲノム編集技術の開発

使用纳米纤维开发基因组编辑技术有助于治疗家族性扩张型心肌病

基本信息

批准号：
22KJ2153
负责人：
古野琴子
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、遺伝子治療のための遺伝子送達が可能な遺伝子担持ナノファイバーの開発を目指した。遺伝子担持ナノファイバーとして、①Lipofectamine/plasmid DNA (pDNA) 複合体を担持した西洋わさび由来ペルオキシダーゼ (HRP) 酵素反応により不溶化したgelatinナノファイバー、②アデノ随伴ウイルス (AAV) ベクターを担持したグルタルアルデヒド架橋反応により不溶化したgelatinナノファイバー、③AAVベクターを担持したポリジオキサノン (PDS) ファイバーの開発に取り組んだ。①では、HRP酵素反応を用いてフェノール性水酸基 (Ph基) 修飾gelatin (Gelatin-Ph) ナノファイバーを不溶化し、その後pDNA複合体のナノファイバー表面への担持を試みた。不溶化したGelatin-PhナノファイバーをpDNA複合体を含む溶液に浸漬した後、処理したGelatin-Phナノファイバー上で細胞を培養することで、遺伝子導入やゲノム編集が可能であることを明らかにした。②では、グルタルアルデヒド架橋反応により不溶化したgelatinナノファイバーをウイルスベクターであるAAVベクターを含む溶液に浸漬することで、ナノファイバー表面へのAAVベクターの担持を試みた。処理したナノファイバー上で培養した細胞に対して遺伝子導入が可能であることを確認した。さらに、マウス肝臓での貼布した部位への領域限定的な遺伝子送達が可能であることを明らかにした。③では、縫合糸として利用されている生分解性を持つ高分子であるPDSから作製したPDSファイバーの表面に、②と同様の方法でAAVベクターを担持した。②同様に、培養細胞及びマウス肝臓に加え、マウス心臓での遺伝子導入及びゲノム編集が可能であることを明らかにした。

This study is aimed at the development of gene therapy, gene delivery and gene support. (1) Lipofectamine/plasmid DNA (pDNA) complex is supported by the HRP enzyme reaction, and (2) gelatin is supported by the AAV enzyme reaction.(3) AAVs are supported by PDSs (PDS). 1. HRP enzyme reaction with Ph group modified gelatin (Gelatin-Ph); 2. Insolubilization; 3. Support of pDNA complex; 4. Insolubilized Gelatin-Ph DNA complexes are immersed in aqueous solutions, treated with Gelatin-Ph DNA, cultured in cells, and then introduced into the genome. 2. To test the support of AAV in aqueous solutions containing the insoluble gelatin in aqueous solutions. The cell culture process was performed to confirm the possibility of gene transfer. The message is sent to the site and the domain is limited. 3. The use of PDS to control the surface of PDS and 2. The use of PDS to control the surface of PDS and 2. The use of PDS to control the surface of PDS. 2. The same process, culture cells and gene transfer, gene transfer and gene editing are possible.