脳オルガノイドを用いた細胞間相互作用解析によるレット症候群の病態解明
使用脑类器官进行细胞-细胞相互作用分析阐明雷特综合征的病理学
基本信息
- 批准号:22KJ2656
- 负责人:
- 金额:$ 2.58万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2023
- 资助国家:日本
- 起止时间:2023-03-08 至 2024-03-31
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
本研究課題では、レット症候群患者由来iPS細胞を用いて、脳の3次元構造を模した脳オルガノイドを介した、神経細胞・アストロサイト・ミクログリアなどの細胞間相互作用の影響を解明することを目的としている。これまでの研究成果として、健常者由来iPS細胞およびレット症候群患者由来iPS細胞のいずれからも、脳オルガノイドを作製する培養系を最適化した。しかしながら、作製された脳オルガノイドはヒト脳の発生初期のような構造的多様性を有してはいたものの、得られた脳オルガノイドの大きさが不均一であり、脳オルガノイド中に含まれる細胞群の大半が神経細胞で占められていた。加えて、この脳オルガノイドは浮遊系で培養していることもあり、培養中に脳オルガノイド同士が融合するなどの問題点が生じることが明らかとなった。このような脳オルガノイドの不均一性を解消するべく、令和4年度では構造体の均一性に着目した脳オルガノイドの作出に取り組んだ。細胞の接着領域を加工した細胞培養プレートを用いることで、従来法の浮遊培養を介さずにiPS細胞からほぼ均一な大きさの脳オルガノイドを作出することが可能となった。そこで健常者由来iPS細胞およびレット症候群患者由来iPS細胞を用いて、この新規手法にて脳オルガノイドを作製し、さらに神経細胞へと終末分化を試みた。得られた神経細胞凝集塊を免疫染色法にて解析したところ、神経細胞マーカーMAP2、シナプスマーカーの1つとして知られるSYN1、アストロサイトマーカーのGFAPを検出することができた。以上の結果から、脳オルガノイドを経て、複数の細胞種が混在する神経細胞凝集塊の作製に成功したと言える。なお、今年度は所属グループで実施していた研究の細胞培養にかかわる部分に参画していたため、共著論文を1報報告することができた。
In this study, the origin of the patients with the syndrome of the disease and the disease was the iPS cell model, the cell model and the cell model. According to the results of the research and the origin of the normal iPS, the patients with the syndrome of iPS syndrome are the patients with the most severe disease. In the early stages of life, the multiplicity that was created in the early stages of life was known to be in the majority of the population, and the majority of the cells in the cell group were in the majority of the population. In addition, please tell me that there is a problem in the system, that is, in the middle of the training, the integration of the students, the students. The purpose of this paper is to determine the accuracy of the resolution of heterogeneity, the uniformity of the system in the year 4, and the accuracy of the system. The cell is then processed in the field, and the cell culture system is used to introduce the iPS cell in the same area as possible. The cause of the disease is that the patients with the syndrome of iPS syndrome come from the patients with the syndrome of iPS syndrome. The patients with the syndrome of the disease use the new methods to treat the patients, and try to differentiate the cells. Cell agglutination and immunostaining method were used to analyze the expression of SYN1, map 2, MAP2, MAP2 and GFAP. As a result of the above results, the number of cells and the number of complex cells were mixed in the cell agglutination test to make a successful speech. This year, the author of this year's report is the author of this year's report, which is based on the study of this year's research.
项目成果
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Chromatin remodeler CHD7 targets active enhancer region to regulate cell type-specific gene expression in human neural crest cells.
染色质重塑剂 CHD7 靶向活性增强子区域,调节人神经嵴细胞中细胞类型特异性基因表达。
- DOI:10.1038/s41598-022-27293-6
- 发表时间:2022-12-31
- 期刊:
- 影响因子:4.6
- 作者:
- 通讯作者:
MeCP2 controls neural stem cell fate specification through miR-199a-mediated inhibition of BMP-Smad signaling
- DOI:10.1016/j.celrep.2021.109124
- 发表时间:2021-05-18
- 期刊:
- 影响因子:8.8
- 作者:Nakashima, Hideyuki;Tsujimura, Keita;Nakashima, Kinichi
- 通讯作者:Nakashima, Kinichi
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野田(安藤) 友子其他文献
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