細胞核内に取込まれた低レベルβ線放出核種の細胞に与える影響

进入细胞核的低水平β射线核素对细胞的影响

• 批准号: 09878105
• 负责人: 矢野倉 美恵子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Medical and Dental University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09878105/
• 关键词: β線放出核種; [^3H]チミジン; アポトーシス; DNA断片化; 過酸化水素; カタラーゼ

1,[methyl-3H]Thymidine([^3H]-TdR)を培地に加え、DNAに^3Hを取込ませると、前骨髄性白血病細胞株HL-60やT細胞由来Molt-4においては、1〜2日後に10〜30%の^3HをDNA内に取込み、DNAラダーを伴う細胞死が認められた。また、T細胞由来Jurkatにおいては、^3HのDNAへの取り込みが2%以下と非常に少なかったが、4日目にはDNAラダーが観察された。これに対して、B細胞由来RajiやSKW6-CL4では、細胞死は認められたもののDNAラダーは観察されなかった。2,HL-60やMolt-4のアポトーシスでは、Caspase-3の活性化及びCaspase-3前駆体の切断が見られ、Caspase-3の基質と言われているDNA依存性プロテインキナーゼ及びポリ(ADPリポ-ス)ポリメラーゼの切断もあわせて認められた。また、Bcl-2及びBadのタンパクレベルに変化は見られず、Baxは減少した。3,Molt-4においては、DNAラダーはCaspase-3の阻害剤によって抑制されたが、Caspase-1の阻害剤によっては抑制されなかった。4,HL-60の変異株HP50-2、HP100-1は過酸化水素抵抗性の細胞株で、それぞれ3倍、18倍のカタラーゼ活性を発現している。これらの細胞に[^3H]-TdRを取り込ませると、いずれも同程度に核内のDNAに^3Hを取込むが、カタラーゼ活性の高い細胞株ほど生存率が高く、HP100-1ではDNAラダーの出現の遅れが観察された。5,蛍光プローブを用い、[^3H]-TdRの取込みによる細胞内のヒドロペルオキドの生成を蛍光顕微鏡によって観察した。この結果、HL-60やHP50-2ではHP100-1に比べ、強い蛍光を発する縮小した細胞がより多く見られた。

1.[methyl-3H]Thymidine([^3H]-TdR)をPEDIKAKAえ, DNAに^3HをGET込ませると, anterior bone marrow leukemia cell line H L-60やT cells originate from Molt-4においては, 1~2 days later, 10~30%の^3HをDNA internal にtake込み, DNA ラダーをassociated with うcell death がidentification められた. The origin of T cells Jurkatが2% or less, に小なかったが, 4-day にはDNAラダーが観看された.これに対して, B cell origin Raji SKW6-CL4 では, cell death はcognition められたもののDNAラダーは観看されなかった. 2. HL-60 Molt-4 Activation of Molt-4 Activation of Caspase-3 and Cutting of the Front Body of Caspase-3 Activation of Caspase-3 ase-3 substrate and DNA dependency testびポリ(ADPリポ-ス)ポリメラーゼの成もあわせてcognizeめられた.また, Bcl-2 and びBadのタンパクレベルに変化は见られず, BaxはREDUCED した. 3. Molt-4, DNA and Caspase-3 inhibitor It inhibits Caspase-1 and inhibits Caspase-1. 4. HL-60 is a different strain of HP50-2 and HP100-1, which is a cell strain that is resistant to peracidification of hydrogen, and is 3 times and 18 times active.これらのcellに[^3H]-TdRをGETり込ませると、いずれもThe same degree of nuclear DNAに^3HをGET込むが、 The cell line with high activity and high survival rate, HP100-1 with high activity and high survival rate of DNA. 5. 荍光プローブを用い、[^3H]-TdRのtake込みによる fine The intracellular light source is generated using a microscopic microscope.このRESULTS, HL-60やHP50-2ではHP100-1に比べ, 强い蛍光を発する shrink したcell がより多く见られた.