臍帯血幹細胞移植術の開発

脐带血干细胞移植的研究进展

• 批准号: 08877123
• 负责人: 高上 洋一
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877123/
• 关键词: cord blocd; transplantation; hematopoietic stem cells; CD34

同種骨髄移植術が唯一の有効な治療法になると考えられる疾患は多い。しかしこれにはHLA適合骨髄ドナーが必要となるため、実際には施行が不可能な患者が多い。このため本研究では臍帯血中に存在する造血幹細胞を採取・凍結保存し、安全に移植術に用いるための手法の確立を目指した。移植術後の造血回復速度は、輸注した幹細胞量に比例する。まず当院で移植した症例で、輸注した幹細胞数やCD34抗原陽性細胞数と移植術後の造血能の回復過程を比較検討し臍帯血幹細胞移植術後の造血機能再構築過程の予測の行い、これを目安に効率的な臍帯血幹細胞の採取・分離・保存法の開発を試みた。その結果、移植に必要なCD34抗原陽性の造血幹細胞数は患者体重1kgあたり2x10^6と判明した。一回の分娩時に採取可能な臍帯血量は限られるため、極く少量の幹細胞を採取した後に体外で各種の造血刺激因子を含む培養系を用いて増幅させ、移植術後の造血回復を促進する技術の開発を試みた。この培養を効率良く行うために、該当年度では免疫ビーズ法を用いて幹細胞抗原であるCD34抗原陽性細胞を臍帯血から純化する手法を確立し、実際にこのように純化した細胞を用いて安全に移植術が施行できることも臨床例で示した。約30回の臍帯血採取を行い採取手順の確認も行った。この知見に基づいて、現在分注の可能な特殊バッグを作成中である臍帯血幹細胞の新たな応用法として先天性代謝異常症治療を目指した遺伝子治療の研究も行った。その結果、純化臍帯血幹細胞に対するNcoR遺伝子導入効率は、骨髄を使用した場合よりも良好なことも確認した。

Bone allotransplantation is the only treatment for many diseases. HLA is not suitable for patients, but it is necessary and impossible. This study aims to establish methods for freezing and preserving hematopoietic stem cells in umbilical cord blood and for safe transplantation. The rate of hematopoietic recovery after transplantation is proportional to the amount of stem cells infused. To compare the number of stem cells transfused, the number of CD34 antigen-positive cells and the recovery process of hematopoietic function after transplantation, and to explore the prediction of hematopoietic reconstitution process after umbilical blood stem cell transplantation. The number of CD34 antigen positive hematopoietic stem cells required for transplantation was determined by the patient's weight of 1kg. The development of technologies for the promotion of hematopoietic recovery after transplantation and the use of culture systems containing various hematopoietic stimulating factors after the collection of a small number of stem cells at the time of delivery The culture rate is good, and the method of purification of CD34 antigen positive cells from umbilical blood is established. In fact, the method of purification of cells is safe to use. About 30 times of umbilical blood collection will be carried out during the procedure and confirmation will be carried out. This knowledge is based on the fact that research on the treatment of congenital metabolic disorders is now being carried out in the context of possible special treatments for umbilical blood stem cells. The results showed that the NcoR gene introduction rate of purified umbilical blood stem cells was very good.

项目成果

Nakao M,Takaue Y.: "Alterations of CDKN2 gene structure in childhood acute lymphoblastic leukemia." Leukemia. 10. 249-254 (1996)

Nakao M，Takaue Y.：“儿童急性淋巴细胞白血病中 CDKN2 基因结构的改变。”