先天性腎低形成・異形成の発症機序に関する分子生物学的研究-低親和性神経成長因子受容体の関与-

先天性肾发育不全/发育不良发病机制的分子生物学研究 - 低亲和力神经生长因子受体的参与 -

• 批准号: 08877129
• 负责人: 副田 敦裕
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08877129/
• 关键词: 先天性腎低形成; 先天性腎異形成; 神経成長因子; 神経成長因子受容体

小児慢性腎不全の原因の20%以上を占めるのは腎低形成・異形成である。これまで我々は神経成長因子(NGF)/受容体(p75)カスケードの神経系での役割を研究してきた。この過程で本疾患が中枢神経系奇形に合併すること。さらにp75が腎の形成過程に重要な役割を果たすことが示唆されたことの2点から、p75の異常は神経系のみならず、腎の形態形成にも異常をもたらすのではないかとの仮説立て、これを証明することを目的に研究を計画した。具体的には(1)正常の腎発生過程におけるp75の発現を経時的に検討する。(2)in vitroにおいてp75の発現を抑制し、如何なる変化が生ずるかを腎の器官培養にて検討する。(3)ラット胎仔の発生過程において、特異抗体を用いてin vivoでp75の作用を阻害し、腎に如何なる障害が生ずるかを検討することを目的とした。研究結果:正常の腎発生過程におけるp75蛋白の経時的発現を検討する目的から、ラットの腎臓につき経時的にp75の発現を特異抗体(抗-ラットp75抗体:clone192)を用いた間接蛍光抗体法にて免疫組織化学染色を行った。ラット胎仔の腎組織にはp75弱陽性細胞が観察されたが、その発現が極めて弱いため、発現細胞を同定することはできなかった。また胎仔腎組織のホモジェネートではノーザンブロットにてp75の発現が認められた。今後、蛍光抗体法に代わり、^<125>I-NGFを用いたin situハイブリダイゼーションによる検討が必要である。また、小児の腎生検材料につきp75ならびに高親和性NGF受容体trkAの発現を間接螢光抗体法にて検討し、小児腎疾患の臨床症状とNGF受容体の発現の関連を検討することは意義あることと考えられた。さらに妊娠ラットに抗NGF受容体抗体を注入し、in vivoでのラット胎仔のNGF/NGFRカスケードを阻害し、腎に如何なる障害が生ずるかを検討することも予定している。

In small 児 chronic renal insufficiency, more than 20% of the cases are caused by を accounting for める cases, and <s:1> renal hypoplasia and abnormal formation である. Youdaoplaceholder1 れまで I 々 々 the economic growth factor (NGF)/ recipient (p75)カスケ れまで ド the <s:1> department of theology で <e:1> is engaged in を research on を て た た た た. The process of で で this disorder が central nervous system strange shapes に merge する する と と. Formation さ ら に p75 が renal の に important な "を cut fruit た す こ と が in stopping さ れ た こ と の 2 か ら, p75 の abnormal は 経 god is の み な ら ず, kidney の morphogenetic に も abnormal を も た ら す の で は な い か と の 仮 said て, こ れ を prove す る こ と を purpose を に research project し た. The specific に に (1) normal process of <s:1> renal development におけるp75 development を time に検 talk する. (2) the in vitro に お い て p75 の 発 を し, now how な る variations change が raw ず る か を renal の organ culture に て beg す 検 る. (3) ラ ッ ト tire tsai の 発 birth process に お い て を, specific antibody with い て in vivo で p75 の role how を resistance against し, renal に な る handicap of が raw ず る か を beg す 検 る こ と を purpose と し た. Results: normal kidney 発 の process に お け る p75 protein の 経 when 発 を now beg す 検 る purpose か ら, ラ ッ ト の renal viscera に つ き 経 when に p75 の 発 now を specific antibody (anti - ラ ッ ト p75 antibodies: clone192) を with い た 蛍 indirect light antibody technique に て immunohistochemical staining line を っ た. ラ ッ ト tire tsai の kidney に は p75 weakly positive cells が 観 examine さ れ た が, そ の 発 が now extremely め て weak い た め, を 発 now cells with す る こ と は で き な か っ た. Youdaoplaceholder0 fetal kidney tissue <s:1> ホモジェネ トで トで ノ ノ ザ ザ ブロットにて ブロットにてp75 samples present が recognition められた. In the future, 蛍 light antibody generation に わ り, ^ < 125 > I - model NGF を with い た in situ ハ イ ブ リ ダ イ ゼ ー シ ョ ン に よ る beg が 検 necessary で あ る. ま た, small where の renal 検 raw material に つ き p75 な ら び に high-affinity NGF plays by let body trkA の 発 を indirect fluorescent antibody method now に て の beg し 検, small where kidney disease clinical symptoms と NGF plays by let body の 発 is の masato even を beg す 検 る こ と は meaning あ る こ と と exam え ら れ た. さ ら に pregnancy ラ ッ ト に anti NGF plays by を let body antibody injection し, the in vivo で の ラ ッ ト tire tsai の NGF plays/NGFR カ ス ケ ー ド を how resistance against し, renal に な る handicap of が raw ず る か を beg す 検 る こ と も designated し て い る.

项目成果

松島 宏: "神経発達と栄養因子" 小児科診療. 60巻5号. 772-780 (1997)

Hiroshi Matsushima：“神经发育和营养因素”儿科学，第 60 卷，第 5 期。772-780（1997 年）