抗線虫薬研究用動物実験代替法の確立:条件寄生性ラブジチス線虫の寄生条件と生活環

抗线虫药物研究动物实验替代方法的建立：条件性寄生性小杆线虫的寄生条件和生命周期

• 批准号: 09877054
• 负责人: 寺田 護
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877054/
• 关键词: Rhabditis pseudoelongata; in vitro増殖; 条件寄生性線虫; 動物実験代替in vitroモデル; 抗寄生線虫薬の作用研究; 分子生物学的・遺伝学的研究; 寄生条件:宿主側; 寄生条件:虫体側

Rhabditis pseudoelongataを用いて抗線虫薬開発のための動物実験代替in vitroモデル系の確立のためにin vivoでの寄生条件の研究を開始した。本線虫は本来自由生活性であるが,従来より患者や動物の糞便から検出されたり,動物での実験感染の報告があり,条件寄生性と考えられた。昨年,マウス,ラットなどを用いて感染実験を行ったが,感染は認められなかった。さらに,この実験に胃酸分泌抑制薬を併用したが,やはり生存虫体は回収できなかった。本研究で使用した線虫が,野々田や他の研究者が使用した株と異なるためか,あるいは完全に胃酸の分泌が抑えられなかった結果,感染が認められなかったと推察された。本線虫はもとも患者の検便より,連続して検出されており,ある期間患者の腸管内に存在していたと考えられる。本来は自由生活性の線虫であるから経口感染が考えられ,胃(pH1.5-2.0)を通過することは必然となり,生存可能なpHの範囲を明らかにすることは,寄生条件を明らかにする上で重要と思われた。そこで今年度の研究では,in vitro実験で,液体培地のpHの違いが線虫の生死および増殖に影響を与えるかどうかを検討した。その結果,幼虫および成虫はpHが3以下あるいは11以上では数時間で死滅した。しかしながら,産み出された虫卵および子宮内虫卵は,上記pHの範囲の培地に5時間浸漬後に通常の培地に移した場合,孵化し増殖した。これらの結果より,偶発的に摂取された本線虫の虫卵,特に子宮内虫卵は,強酸性状態の胃を通過することができ,腸管内で孵化増殖する可能性が示唆された。今後は,in vitro培養から生物学的特性をさらに解明し,in vivoでも遺伝的背景の異なるマウス系統を用いて,寄生条件の解明を目指す。

Rhabditis pseudoelongataを using て antinematode drugs to develop ため <s:1> animal experiments instead of in vitroモデ <s:1> strains to establish <s:1> ためにin vivoで parasitic conditions <e:1> studies を began た. The nematodes は free sex life originally で あ る が, 従 to よ り patients with や の animal feces か ら 検 out さ れ た り, animal で の be 験 infection の report が あ り, conditions of parasitic と exam え ら れ た. Last year, められな ウス,ラットな を を を infected with を て experiment を to ったが, infected with められな められな った った. Youdaoplaceholder0, <s:1> <s:1> experimental に gastric acid secretion inhibitor を combined with <s:1> たが,や に に に survival organism で reproduction で な な った った った った った. This study use で し た nematodes が, wild field や 々 he が の researchers use し た と different strains な る た め か, あ る い は completely に gastric acid secretion の が え suppression ら れ な か っ た results, infection が recognize め ら れ な か っ た と push examine さ れ た. The nematodes は も と も patients の 検 then よ り, even 続 し て 検 out さ れ て お り, あ る の insufflate に exist within the patient during し て い た と exam え ら れ る. Originally は free life sex の nematodes で あ る か ら 経 mouth infection が exam え ら れ, stomach (pH1.5 2.0) を through す る こ と は inevitable と な り, survival may な pH の van 囲 を Ming ら か に す る こ と は, parasitic conditions を Ming ら か に す る で important と think わ れ た. そ こ で our の research で は, the in vitro be 験 で, liquid petty の pH の violations い が nematodes の death お よ に influence を び raised colonization and え る か ど う か を beg し 検 た. The result is そ そ, the larva および, the adult <s:1>, the pH is が below 3 ある, the た is over 11 で, the number of times is で, the extinction is た た. し か し な が ら, produce み さ れ た eggs お よ び uterus は eggs, written pH の van 囲 の petty に 5 time after dipping に usually の petty に move し た occasions, hatching し raised colonization し た. こ れ ら の results よ り, accidentally 発 に, take さ れ た this nematode の eggs, especially に uterus は eggs, strongly acidic state の stomach を through す る こ と が で き, insufflate the hatch で す rights colonization が る possibility in stopping さ れ た. は in the future, the in vitro cultivation か ら biology characteristics of を さ ら に interpret し, the in vivo で も but 伝 background の different な る マ ウ ス systems を い て, parasitic conditions の interpret を refers す.

项目成果

寺田 護: "抗線虫薬の作用研究用の新しいin vitro実験モデル系としてのRhabditis (Rhabditella) pseudoelongata Micoletzky,1913" 寄生虫誌. 45・5. 408-416 (1996)

Mamoru Terada：“Rhabditis（Rhabditella）pseudoelongata Micoletzky 作为研究抗线虫药物作用的新体外实验模型系统，1913 年”寄生虫学杂志 45・5（1996 年）。

寺田 護: "駆虫活性検定を目的としたStomachorhabditis属新線虫のin vitro培養について" 寄生虫誌. 43・増刊. 82 (1994)

Mamoru Terada：“用于测试驱虫活性的胃小杆属新线虫的体外培养”，寄生虫学杂志 43，特别版（1994 年）。

須田久也: "ヒト糞便由来のRhabditis pseudoelongataを用いた抗線虫薬のin vitroスクリーニング法に関する基礎的検討" 第122回日本獣医学会講演要旨集. 115 (1996)

须田久弥：“利用来自人类粪便的拟长杆线虫体外筛选抗线虫药物的方法的基础研究”第122届日本兽医协会会议记录115（1996）。