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肉芽腫形成における好中球の役割:好中球による単球走化因子の産生

中性粒细胞在肉芽肿形成中的作用：中性粒细胞产生单核细胞趋化剂

基本信息

批准号：
09877156
负责人：
田上八朗
金额：
$ 0.83万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877156/
关键词：
好中球補体 CR3 単球走化因子

项目摘要

ヒト角層と正常人血清と37℃、60分反応させた後、血清成分を洗い流し、1×10^6/mlにsuspendしたヒト好中球と一緒に37℃で24時間培養して得られた培養上清の中に含まれる単球走化活性をmodified Boyden chamberを用いて測定した。その結果、培養上清の中に単球走化活性があることが示された。さらに、divided chamberで好中球と角層の接触させないと単球走化活性が誘導されないこと、また、抗CR3抗体で単球走化活性が抑制されたことから、好中球はCR3を介して、iC3bでオプソニン化された角層に接着し、そのシグナルを通して活性化され、単球走化活性因子を放出することが分かった。これまで、LPS刺激した好中球はchmokine familyであるMIP-1αやMIP-1β,MCP-1などの単球走化因子を放出することが分かっている。上記実験で得られた培養上清中にこれらの単球走化因子が含まれるかどうかELISA法を用いて検討した。その結果、培養上清中にMIP-1α,MIP-1β,MCP-1のいずれもが含まれていたが、好中球と角層の接触がおこる状態で、単球走化因子の産生量は変化しなかった。さらに、培養上清をこれらの因子の阻止抗体で処理しても、単球走化活性の抑制は軽度であった。MIP-1αやMIP-1β,MCP-1とは異なる単球走化因子が含まれていると考え、培養上清をHPLC(ゲル漉過)で各フラクションに分けて、それぞれの単球走化活性を測定したところ、40kD前後の分子量を持つ単球走化因子が検出された。しかし、どのような物質であるかどうかは同定できなかった。

After 60 minutes of incubation at 37℃, serum components were washed and 1×10^6/ml was suspend. The supernatant was incubated at 37℃ for 24 hours. The activity of the modified Boyden chamber was determined. The results show that the culture supernatant has high activity. In addition, the contact between the divided chamber and the corner layer induces, inhibits, and activates the anti-CR3 antibody, the anti-CR3 antibody, and the anti-CR3 antibody. Therefore, LPS stimulates the release of MIP-1α and MIP-1β from the chmokine family, and MCP-1α and MCP-1 β are released separately. The above results show that the culture supernatant contains the same protein as the culture supernatant. The results showed that MIP-1α,MIP-1β,MCP-1 in the culture supernatant were mainly contained in the medium, and the contact state between the medium and the corner layer was good, and the production amount of the single spherical chemical factor changed. In addition, the culture supernatant can inhibit the activity of the antibody. MIP-1α and MIP-1β,MCP-1 are different from each other in terms of single spherical mobility factors, including molecular weight, single spherical mobility factors before and after 40kD, and HPLC(column chromatography) in culture supernatant.しかし、どのような物质であるかどうかは同定できなかった。