イネ核局在型いもち病菌エフェクターがいもち病菌の病原性に果たす役割の解明

阐明核定位稻瘟病菌效应子在稻瘟病菌致病性中的作用

• 批准号: 26450060
• 负责人: 南 栄一
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: National Institute of Agrobiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-26450060/
• 关键词: イネいもち病菌; 核移行エフェクター; 病原性; GFP; 蛍光観察; 核局在; いもちエフェクター; 遺伝子破壊; パーティクルガン法

対象とする6種類のいもち病菌エフェクター遺伝子のうち、ME0009およびME0016について遺伝子を破壊したいもち病菌系統を作出した。またこれらを含めた全6種類の遺伝子を恒常的に強発現する組換えイネをそれぞれ3系統以上作出した。このうち遺伝子破壊いもち病菌について病原性の検定を実施したがいずれにおいても野生型と比較して有意な病原性の変動は認められなかった。また、これらの遺伝子を強発現する組換えイネでいもち病抵抗性が有意に抑制されるような結果は認められなかった。これらの遺伝子産物が実際の感染の過程においてもイネ細胞核に移行することを検証するために、自身のプロモーターの下流にタンパク質コード領域と赤色蛍光タンパク質mCherryとの融合遺伝子を持つキメラ遺伝子を作出し野生型のいもち病菌に導入した。これらを、細胞学にGFPが局在するようにした組換えイネの葉鞘に接種し、36時間後に蛍光を観察したところ、ME0008, ME0009, ME0014, ME0032の4種類のタンパク質がイネ細胞核に移行することが証明された。他の2種類は明確な核局在が確認できなかったが、これは自身のプロモーターが強くないために、発現量が低かったことによるのではないかと推察された。

Like と seaborne す る 6 kinds の い も ち germs エ フ ェ ク タ ー heritage 伝 son の う ち, ME0009 お よ び ME0016 に つ い て heritage 伝 son を broken 壊 し た い も ち bacteria system を make し た. ま た こ れ ら を containing め た totally 6 kinds の but 伝 を constant strong に 発 now す る group in え イ ネ を そ れ ぞ れ above 3 system make し た. こ の う ち heritage 伝 son broken 壊 い も ち germs に つ い て pathogenicity の 検 set を be applied し た が い ず れ に お い て も wild-type と compare し て intentionally な pathogenicity の - move は recognize め ら れ な か っ た. ま た, こ れ ら の posthumous son 伝 を strong 発 now す る group in え イ ネ で い も ち disease resistance が intentionally に inhibit さ れ る よ う な results は recognize め ら れ な か っ た. こ れ ら の heritage 伝 zi chan content が be the の の infection process に お い て も イ ネ nucleus に transitional す る こ と を 検 card す る た め に, の プ ロ モ ー タ ー の obscene に タ ン パ ク qualitative コ ー ド field, red light 蛍 と タ ン パ ク qualitative mCherry と の fusion heritage 伝 son を hold つ キ メ ラ posthumous son 伝 を make し wild-type の い も ち germs に import し た. こ れ ら を, cytology に GFP が bureau in す る よ う に し た group in え イ ネ の leaf sheath に after vaccination し, 36 time に 蛍 light を 観 examine し た と こ ろ, ME0008 ME0009, ME0014, ME0032 の 4 kinds の タ ン パ ク qualitative が イ ネ nucleus に transitional す る こ と が prove さ れ た. He の 2 types は clear な nuclear agency in が confirm で き な か っ た が, こ れ は itself の プ ロ モ ー タ ー が strong く な い た め に, low amount 発 now が か っ た こ と に よ る の で は な い か と push examine さ れ た.

项目成果

宿主核に移行するいもち病菌エフェクターの解析

迁移到宿主细胞核中的瘟疫真菌效应物的分析

• 发表时间: 2016
• 作者: 横谷尚起;南 尚子;西村岳志;川原善浩;光原一朗;西澤洋子;南 栄一
• 通讯作者: 南 栄一